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专题二 细胞工程 一、细胞工程的概念 应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同,可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。 细胞工程的概念理解 1.原理和方法:细胞生物学和_____________ 2.操作水平:___________或细胞器水平 3.工程目的: 按照人的意愿来改变_________________或______________。 4.根据操作对象的不同分类 植物细胞工程和_______________。 分子生物学 细胞水平 细胞内的遗传物质 获得细胞产品 动物细胞工程 一、细胞工程的概念 五、动物细胞培养 1.概念与操作流程 取动物相关组织块 ?分散成单个细胞 放人适宜培养基 ?让细胞生长和增殖 ?剪碎胰蛋白酶处理 ?胰蛋白酶处理分瓶培养 ?组织 ?单个细胞 ?细胞悬液 ?原代培养 ?传代培养 2.条件 (1)无菌、无毒:对_____________________无菌处理,添加 ________,定期更换培养液以清除代谢产物。 (2)营养:除正常的有机和无机营养外,加入____________。 (3)适宜的温度和pH:温度为___________(哺乳动物),pH 为___________。 (4)气体环境:含____的空气加_______的混合气体。 3.应用 生物制品的生产、检测__________、医学研究。 培养液和所有培养用具 抗生素 血清、血浆 36.5±0.5℃ 7.2~7.4 95% 5%CO2 有毒物质 六、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物核移植概念 是将动物的一个细胞的________移入一个_______________中, 使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新胚胎最终发育为___________。 细胞核 去核的卵母细胞 动物 个体 2.过程 供体体细胞 细胞培养 供体细胞核 ?重组细胞 ?卵巢卵 母细胞 去核 无核卵母细胞 ?胚胎 ?代孕母体 生出与供体遗传物质 ?基本相同的个体 ?注 人 减Ⅱ ?中期 发育 ?胚胎移植 ?细胞 融合 3.应用 (1)加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。 (2)保护__________。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为异种移植的_____。 (5)用于组织器官的_____。 【点拨】核移植过程中供体理论上是提供细胞核,但操作过程中 可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去,原因是体细胞体积 相对较小,取核难度较大,另外细胞膜对核融合的障碍性较小。 濒危物种 供体 移植 植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 过 程 外植体 ?愈伤组织 根、芽或胚状体 试管苗 脱分化 再分化 动物组织块 细胞悬液 原代培养(细胞贴壁生长) 胰蛋白酶处理, 分瓶继续培养 ?传代培养 ?少数细胞获得 不死性(癌细胞) 剪碎、胰蛋 白酶处理 放入培养瓶 接触抑制 10~50代 供体 受体 体细胞核 卵母细胞 重组细胞 早期胚胎 个体 导入 去核 胚胎移植 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 结 果 关 键 环 节 与外植体完全相同的个体 相同分化程度的细 胞群 与供体基本相同的 个体 细胞的脱分化、再分化、 分化 细胞分化、细胞癌变 核融合、细胞分化 1.动物细胞融合 (1)概念:指两个或多个动物细胞结合形成_________的过程。 (2)融合方法:_____________、___________、电激等。 (3)意义:突破了______________的局限,使_________成为可 能,也为制造____________开辟了新途径。 一个细胞 聚乙二醇(PEG) 灭活的病毒 有性杂交方法 远缘杂交 单克隆抗体 七、动物细胞融合与单克隆抗体 2.单克隆抗体 (1)制备: 抗原 小鼠 多种杂交细胞 杂交瘤细胞 产生专一抗体的杂交瘤细胞 单克隆抗体。 (2)优点:特异性强、___________,可大量制备。 (3)用途:作为___________;用于治疗疾病和__________。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 培养、筛选 体内、体外培养 灵敏度高 诊断试剂 运载药物 单克隆抗体制备过程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 过 程 细胞A、B 原生质体A、B 融合的原生质体 杂种细胞 杂种植株 去壁 融合 植物组织培养 细胞A、B 杂交细胞 多个相同杂交细胞 融合 有丝分裂 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比
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