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基因工程 谁能告诉我这是WHAT? 谁能告诉我这是WHAT? 1.基因工程的正确操作步骤是( )①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的检测与鉴定④提取目的基因 A. ③②④① B. ②④①③ C. ④①②③ D. ③④①② C 练一练 2.采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是( )①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导入 细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵中A.①② B.②③ C.③④ D.④① C 3.要使目的基因与运载体重组,所需的两种酶是( ) ①限制酶 ②DNA连接酶 ③解旋酶 ④还原酶 A.①② B.③④ C.①④ D.②③ A 4、在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) A、两种连接酶 B、两种限制酶 C、同种连接酶 D、同种限制酶 D 5、以下是两种不同的限制酶切割形成的DNA片段: (1)——CTGCA ——G (2)——G ——CTTAA (4) G—— ACGTC—— (3)AATTC—— G—— 你能用DNA连接酶将它们连接起来吗? 和 能连接; 和 能连接。 (1) (4) (2 ) (3 ) 下列关于基因工程的叙述中,正确的是: A.限制酶只用于提取目的基因B.细菌体内的环状DNA均可作运载体C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成. 以下说法正确的是: A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定能够成功表达 C B 能发光的水母 能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 会发光的转基因鱼 概念:把在一个生物体内分离得到或人工合成的目的基因导入另一个生物的细胞,定向地使后者获得新的遗传性状或表达所需产物的技术。 原 理: 操作水平: 特 点: 基因重组 DNA分子水平 ①定向地改造生物的遗传性状。②打破了物种界限。 一、基因工程的概念 实例:培育抗虫棉的简要过程: 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 二、基因操作的工具 基因的“剪刀” —— 限制性核酸内切酶 基因的“针线” —— DNA连接酶 基因的运载工具 —— 运载体 1.基因的“剪刀”──限制酶 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上切割DNA分子。 特点:专一性(特异性) 微生物 来源: “ ” 大肠杆菌(EcoRI )的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在 G 和 A 之间切开。 限制酶作用部位:磷酸二酯键 磷酸二酯键 ★ 什么叫黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端 被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端,碱基能够通过互补进行配对。 CTTCATG GAAGTACTTAA GGGATT AATTCCCTAA ACG TGCTTAA AATTCCCATT GGGTAA GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG —DNA连接酶 CTTCATG GAAGTACTTAA GGGATT AATTCCCTAA GGCATCTTAA AATTCCGTAG DNA 连 接 酶 思考:如何将重组DNA分子送入受体细胞呢? 2、基因的针线 DNA连接酶可把脱氧核糖和磷酸交替连接而成的DNA骨架上的缺口“缝合”起来(形成磷酸二酯键),这样一个重组的DNA分子就形成了。 3、基因的运载体 目的基因 常用的运载体: 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 作为运载工具(分子运输车 ),将外源基因转移到受
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