精液的冷冻保存解读.pptVIP

精液的冷冻保存 主讲人：朱秀生 一、实验目的：练习公猪、公牛精液冷冻保存的方法，要求学会： 1、稀释液和解冻液的配制方法； 2、精液的稀释、降温、平衡及制冻的技术； 3、冷冻精液的解冻技术。 二、实验材料：公猪精液、公牛精液、新鲜牛奶、新鲜鸡蛋、葡萄糖、蔗糖、甘油、柠檬酸钠（二水）、蒸馏水、量筒、玻璃注射器、烧杯、三角烧瓶、滴管、冰壶、保温杯或小液氮罐或泡沫盒、冰、液氮、0.25mL塑料吸管、冷冻架、温度计、水盆、纱布、棉花，抹镜纸、75%精棉球、镊子、捞筛、液氮罐、载玻片、小玻棒、石腊油、显微镜、水浴锅、铝锅、电炉、标记笔等。 精液冷冻保存原理 精子在超低温下，其代谢活动几乎停止（完全被抑制），使其在静止状态下保存下来，一旦升温又能复苏而不失去受精能力。其理论依据是玻璃化假说和甘油保护学说。 （1）玻璃化假说 物质的存在形式有气态、液态和固态，其中固态又分为结晶态和玻璃态。在不同的温度条件下，这两种形式可以相互转化。 A.结晶态 当精液的温度由冰点（0℃）缓慢降到-60℃左右时，精液中的水分由液态变成固态，冰晶颗粒大而均匀，叫做结晶态或冰晶化。对细胞内的细胞器构成巨大的破坏作用，因而，把这一温度区称为有害温区。缓慢降温形成冰晶化是造成精子死亡的主要原因。 B.玻璃态 但在特定冷冻剂参与下，精液由低温骤然降到-60℃度以下，精液变成固态时，冰晶颗粒细小而均匀，叫做玻璃