细胞培养技术与应用详细分析.ppt

蚌科 三角帆蚌 （珠质细腻、光滑、色泽鲜艳、较圆，质量最佳，但成珠慢） 褶纹冠蚌 （珍珠长圆形，白色或粉红色；成珠快，产量高） 一、电子显微镜检测技术 研究病毒形态、鉴定 诊断病毒病 检测不能在体外培养的病毒，如轮状病毒、星状病毒、嵌杯病毒、HAV等都是用电镜最先发现的——能进一步发现新的病毒和病毒病。 1、正染法（超薄切片法、病组织） 将细胞用戊二醛固定，然后脱水、包埋、切片、染色、观察病毒颗粒，通常1~2 d完成。 操作复杂、费时，但样品可长期保存，可观察病毒粒子形态与发生过程。 2、负染法 直接将病毒悬液(也可用细胞)滴在铜网上，用重金属(通常用磷钨酸) 进行染色，观察病毒颗粒，10-20min可出结果。 原理：负性染料不渗入病毒颗粒，而是将病毒颗粒包绕，由于负性染料含重金属使电子束不能穿透，病毒颗粒具有亮度，在周围暗背景上显示亮区——较正染法显示的图像清晰，可显示病毒的结构。 缺点：敏感性低，要求病毒量在107／mL以上，同科病毒难于鉴别。 3、投影技术 二、病毒的免疫检测 主要试剂: 酶标记的抗体或抗原 酶标物特点： 免疫学活性 酶对底物的催化活性 三个部分： 免疫反应 酶与底物反应 检测方法的建立 （一）固