[12秋]C22免疫学检测技术的基本原理(1学时)调研报告.pptVIP

* 磁珠分离法 免疫吸附分离法 流式细胞术 肽—MHC四聚体技术 淋巴细胞及其亚群的分离 * 免疫吸附分离法 加入淋巴 细胞悬液 anti-CD4 anti-CD4 anti-CD4 弃上清 * 磁珠分离法 * 流式细胞术 荧光抗体标记混合细胞 喷嘴 单细胞悬液 5000-10000个/秒 细胞分选器 荧光 检测器 * 抗原肽-MHC四聚体分离技术 亲和素 抗原肽 MHC I 生物素 anti-CD8 肽-四聚体 肽特异性CD8T CD4T及B 非肽特异性CD8T 荧光素 * 二、免疫细胞功能的测定 T细胞功能测定 B细胞功能测定 细胞因子检测 T细胞增殖试验 迟发型超敏反应的检测 抗体含量测定 溶血空斑试验 巨噬细胞吞噬试验 细胞毒试验 吞噬功能测定 51Cr释放法 乳酸脱氢酶释放法 细胞染色法 凋亡细胞检测法 硝基蓝四氮唑试验 生物活性检测法 免疫学检测法 * T细胞功能测定 T细胞增殖试验 迟发型超敏反应的检测 T细胞受到特异性抗原或有丝分裂原刺激后发生增殖，可通过以下三种方法检测： 形态计数法：活化细胞体积增大、形态不规则、胞质增多、细胞核松散及出现较多核仁； 3H-TdR或125I-UdR掺入法：3H-TdR能掺入到合成的DNA中，用液体闪烁仪检测样品的放射活性，特点是灵敏可靠，但须特殊仪器，易有放射性污染。 MTT (四甲基偶氮唑盐)比色法： 外来抗原刺激机体产生免疫应