2.聚合酶链式反应技术解说.pptVIP

* * * 5u/μl Taq DNA聚合酶: 0.5 ～ 5 U / 100 μl 1U / 25 ～ 50μl * PCr仪上进行目的基因的扩增。 整个过程持续2-3h。 学习PCR仪的使用；Pcr扩增程序的设置；练习移液器的使用。 安排人员取样 安排卫生。 * * * PCR扩增目的基因NS1（500bp） 1. 反应混合液的配制 在0.2ml PCR管内配制25ul反应体系。 冰上进行。 在0.2ml PCR管内配制20ul反应体系。 实验二、 聚合酶链式反应技术 一、实验目的 通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR) ：是体外酶促合成DNA片段的一种技术。利用PCR技术可在数小时之内大量扩增目的基因或DNA片段，以用于基因工程操作。 二、实验原理 PCR的原理： 用于扩增位于两段已知序列之间的DNA片段，类似于天然DNA的复制过程。 以拟扩增的DNA分子为模板，用一对与待扩增的靶DNA区段两端序列互补的人工合成的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸