第四章基因克隆的载体讲课.pptVIP

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  • 2017-05-11 发布于湖北
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2)端粒(telomere sequences, TEL) 定位于染色体末端一段序列,用于保护线状的 DNA不被胞内的核酸酶降解,以形成稳定的结构。 3)自主复制序列( autonomous replicating sequence ,ARS) 一段特殊的序列,含有酵母菌中 DNA 进行双向复制所必须的信号,是染色体自主复制的复制起点。 4)YAC 载体的选择标记 主要采用营养缺陷型基因,如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp1、 leu2和 his3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等,以及赭石突变抑制基因 sup4 。 但是YAC的一个突出优点是,酵母细胞比大肠杆菌对不稳定的、重复的和极端的DNA有更强的容忍性。 另外,YAC在功能基因和基因组研究中是一个非常有用的工具。由于高等真核生物的基因大多数是多外显子结构并且有长长的内含子,大型基因组片段可通过 YAC 载体转移到动物或动物细胞系中,进行功能研究。 F 质粒 ???? 大肠杆菌的 F 因子是一个约 100kb 的质粒。它编码60多种参与复制、分配和接合过程的蛋白质(Willetts and Skurray,1987)。虽然 F 因子通常以双链闭环DNA(1-2个拷贝/细胞)的形式存在,但它可以在大肠杆菌染色体中至少30个位点处进行随机整

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