07-1-色谱法原理和基础论述.pptVIP

Chromatography中南民族大学2011.秋色谱法内容原理和基础气相色谱21液相色谱3简介第一节一、色谱法的发展史最早创立色谱法的是俄国植物学家Tswett1906年他为了分离植物色素，将植物绿叶的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中，并用石油醚自上而下淋洗，由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同，随着淋洗的进行，不同色素向下移动的速度不同，形成一圈圈不同颜色的色带，使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法（chromatography）。一、色谱法的发展史在Tswett提出色谱概念后的20多年里没有人关注这一伟大的发明。直到1931年德国的Kuhn和Lederer才重复了Tswett的某些实验，用氧化铝和碳酸钙分离了α-，β-，和γ-胡萝卜素，此后用这种方法分离了60多种这类色素。Martin和Synge在1940年提出液液分配色谱法（Liquid－LiquidPartitionChromatography），即固定相是吸附在硅胶上的水，流动相是某种有机溶剂。1941年Martin和Syngee提出用气体代替液体作流动相的可能性，11年之后James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气液色谱方法（Gas－LiquidChromatography），因而获得了1952年的诺贝尔化学奖。1957年Golay开创了开管柱气相色谱法（Open－TubularColumnChromatography）1956年VanDeemter等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论一、色谱法的发展史1944年Consden等就发展了纸色谱，1949年Macllean等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄层板使薄层色谱法（TLC）得以实际应用；60年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱，出现了高效液相色谱（HPLC）；80年代初毛细管超临界流体色谱（SFC）得到发展，但在90年代后未得到较广泛的应用；在80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳(CE)，在90年代得到广泛的发展和应用。同时集HPLC和CZE优点的毛细管电色谱在90年代后期受到重视。色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作年代获奖学科获奖研究工作1937化学类胡萝卜素化学，维生素A和B1938化学类胡萝卜素化学1939化学聚甲烯和高萜烯化学1950生理学、医学性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离1951化学超铀元素的发现1955化学脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素1958化学胰岛素的结构1961化学光合作用时发生的化学反应的确认1970生理学、医学关于神经元触处迁移物质的研究1970化学糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用1972化学核糖核酸化学酶结构的研究1972生理学、医学抗体结构的研究色谱法在分析化学中的地位和作用年代194519551965197519851995仪器分析方法光谱法14.326.328.729.730.030色谱法1.42.312.026.735.036电化学法4.46.210.213.515.016放射分析法1.02.06.513.817.018经典分析法比色法23.020.015.29.22 滴定法25.622.012.65.11重量法8.56.53.62.0？不同年代各种分析方法所占的比例二、色谱法的特点色谱法是以其高超的分离能力为特点，它的分离效率远远高于其它分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。优点分离效率高：可以分离复杂混合物，有机同系物、异构体、手性异构体。灵敏度高：可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。分析速度快：一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。应用范围广：气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。不足之处：被分离组分的定性较为困难。三、色谱法的分类三、色谱法分类按流动相和固定相的状态分类三、色谱法分类按分离机理分类吸附色谱法：吸附能力强弱分配色谱法：溶解度不同离子交换色谱法：离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同尺寸排阻色谱法：多孔固定相中的选择渗透亲和色谱法：与固定相（固定化分子）的高专属性亲和力三、色谱法分类按固定相的外形分类柱色谱：固定相装于柱内平板色谱：固定相呈平板状薄层色谱纸色谱色谱流出曲线及术语第二节色谱的信号和曲线色谱是一种分离技术色谱的信号都是外加的检测仪器给出的信号是和组分的浓度成正比色谱流出曲线及有关术语一．流出曲线和色谱峰如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温线的线性范围内，色谱峰如果对称，可用Gauss正态分布函数表示：式中：C—不同时间t时某物质的浓度，C0—进样浓度，tr—保留时间，σ—标准偏差。 二、基线baseline是柱中