慢性荨麻疹中医证型与人外周血单核细胞分泌的Th-%2c1-%2fTh-%2c2-细胞因子关系的实验研究.pdf

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1.原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独 立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论 文不含其他任何个人或集体己经发表或撰写过的作品或成果。对本文 的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本 声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名:李建五 日期:ch々年于月晚 学位论文使用授权说明 本人完全了解湖北中医学院关于收集、保存、使用学位论文的规 定,即: 按照学校要求提交学位论文的印刷本:学校有权保存学位论文的 印刷本;在不以赢利为目的的前提下,学校可以公布学位论文的部分 或全部内容。(保密论文在解密后,遵守此规定) 论文作者签名:李l√。导师签名;澎,/ 日期:加07年\r月确 中文摘要 目的:通过对慢性荨麻疹进行中医辩证分型,并捡测慢性荨麻疹各型患者外周血 单一核细胞分泌的Thl和Th2细胞因子水平,明确两者的关系,探讨慢性荨麻疹 可能的发病机制。为中医药治疗慢性荨麻疹提供治疗相关的实验依据。通过近年 的研究发现:慢性荨麻疹与T辅助细胞亚群的功能失衡有密切的关系。慢性荨麻 疹患者存在Thl细胞因子水平下降而Th2细胞因子水平上升。通过治疗后Thl/Th2 细胞园子趋向平衡,因此认为慢性荨麻疹存在Thl/Th2细胞因子失衡。暂未检索 到慢性荨麻疹中医辨证分型与Thl和Th2细胞因子水平相关的研究。 方法: l慢性荨麻疹患者的选用标准: I.1皮肤粘膜表面复发性风团。持续时间不超过24小时。 I.2每周发作不少于2次. 1.3病程超过6周. 1.4l周内未使用抗组胺药物,1月内未使用类固醇激素药物及免疫抑制药物. 2慢性荨麻疹排除标准: 2.1排除由寒冷。压力,振动.日光.运动。情绪.摩擦等引起的物理性荨麻疹. 2.2排除蛊身免疫性疾病。如甲状腺疾病,白癜风.胰岛素依赖性糖尿病.类风 涅性关节炎等. 3慢性荨麻疹患者中馐辨证分型标准: 3.I风热犯表:风团鲜红,灼热剧痒。伴有发烧.恶寒.咽喉肿痛,遇热则皮疹 加重.舌苔薄白或薄黄,脉浮数; 3.2风寒柬表:皮疹色白,遇风寒加重,得暖则减,口不渴。舌质淡,舌苔白, 脉浮紧: 3.3血虚风燥:反复发作,迁延日久,午后或夜问加剧。伴心烦易怒,口干,手 足心热。舌红少津,脉沉细。 4人外周单一核细胞的分离技术 慢性荨麻疹患者68例和正常人24例体外抽取患者新鲜静脉血5ml,采取 Ficoll等密度沉降分离法,得到淋巴细胞和单核细胞,以RPMll640培养液定客, x 制成细胞悬液,细胞浓度为1 106/m!。 5细胞活力的检测方法:选用台盼蓝排斥试验,以0.4%台盼蓝进行染色,在3rain 中内计数活细胞达95%vl上。 6培养细胞的常规观察: 6.I形态和细微结构变化:淋巴母细胞体积变大,细胞核明显,有团块凝集现象。 6.2培养液的观察:正常新鲜的含酚红的培养液为粉红色,一旦很快交黄,注意 是否有细菌污染的可能。 8用ELISA方法检测各组上清液的细胞因子(IL-4,IFN-r)的含量。 9统计学方法:检测值使用SPSS统计软件包进行方差分析和成对资料的t检验, 检测值统计处理的结果用均数±标准差(x士s)表示。 结果 1慢性荨麻疹细胞培养形态和细微结构变化观察:T细胞在体外受到植物血凝素 (PHA)的刺激后,发生一系列增生反应,如细胞体积变大,细胞核明显,胞浆 增多,出现空泡,染色质疏松,有团块凝集现象,证明淋巴细胞转化为淋巴母细 胞。 2慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞在体外PHA刺激后,发现慢性荨麻疹风热犯 表型、风寒束表型和血虚风燥型患者IL-4细胞因子水平均高于正常人。血虚风 燥组IL-4细胞因子水平高于风热袭表组和风寒束表组,但无统计学意义;慢性 2 荨麻疹风热犯表型.风寒束表型和血虚风燥型患者[FN一-f细胞因子水平均低 于正常人。血虚风燥组IFN-r细胞因子水平低于风热袭表组和风寒束表组,无 统计学意义。 结论 1慢性荨麻疹患者存在Thl/Th2细胞因子失衡。不同中医证型慢性荨麻疹均存在 IL一4细胞因子水平升高和IFN-

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