第三章补体资料.pptVIP

补体结合试验（Complement fixation Test, CFT） 补体结合试验原理： CFT是根据任何抗原抗体复合物可激活、固定补体的特性，以绵羊红细胞（SRBC）和溶血素（抗SRBC的抗体）作为指示系统的检测抗原抗体间有无特异性结合的一类实验。 图1 抗原（antigen Ag）与抗体（antibody Ab）结合形成免疫复合物（immune complex IC） 图2 免疫复合物与补体结合，使补体发生作用，失去活性。 Ag Ag Ag Ag 图1 图2 Ab 补体（complement） SRBC 图1 绵羊红细胞与溶血素（hemolysin）即抗绵羊红细胞结合，形成致敏绵羊红细胞（SRBCs）。 图2 致敏绵羊红细胞与补体结合，使其激活，补体发生溶细胞作用，引起红细胞肿胀，发生溶血。 图1 图2 SRBC SRBC 补体(complement) SRBC SRBC hemolysin SRBCs SRBCs 当抗原与抗体不相对应时，补体则不被结合而游离存在。此时如在上述反应系统中．加入绵羊红细胞(抗原)和溶血素(抗体)系统，即可与游离的补体结合而出现溶血现象。因此，绵羊红细胞和溶血素是CFT的指示系统(亦称溶血系统)。试验结果根据溶血现象是否产生，即可得知检测系统中有无相应的抗原或抗体存在。 待测系统 抗原+未知血清 1 2 补体 1 2 Step 1 抗原抗体复合物的形成 Step 2 补体的结合和耗竭 指示系统 SRBC+抗SRBC抗体 Step 3 SRBC的裂解 1 2 1：No Ab； 2：Ab Ag 待测血清 Ab 阳性 No Ab 阴性 Ag Ag Ag 尽管补体结合实验操作比较繁杂，但具有高度特异性和敏感性的优点，仍然是诊断人畜传染病和寄生虫病常用的血清学方法之一，通常是用已知抗原诊断未知血清，如牛肺疫、马传染性贫血、乙型脑炎、钩端螺旋体、锥虫病、边虫病、口蹄疫等。 参考文献 1.高晓明编著：医学免疫学基础，北京:北京医科大学出版社，2001 2.杨汉春主编：动物免疫学，北京:中国农业大学出版社，2003 3.杜念兴主编：兽医免疫学，北京:中国农业出版社，1997 4.周光炎主编：免疫学原理，上海:上海科学技术文献出版社，2000 1.补体的概念 存在于人和动物正常新鲜血清中具有酶样活性的一组不耐热的球蛋白，是重要的非特异性免疫分子。 本章小结 2.补体系统的激活途径 3.补体系统的生物学活性 * * Components of membrane attack pathway C6 C 9 C8 C7 C5 C5 b C5a C5-activation assembly and insertion of MAC into cell membrane C5 b C6 C7 C8 C 9 C 9 C 9 C 9 C 9 C 9 C 9 C 9 C 9 C4b2b3b裂解C5 C5a C5b,与C6、C7结合形成复合物C5b67 C5b67结合于抗原表面，并自动吸附C8，形成C5b678 C5b678吸附C9，形成C5b6789，形成跨膜通道 效应：胞内渗透压降低，细胞溶解 攻膜复合体 membrane attack complex, MAC 补体的经典激活途径 2、补体替代激活途径 替代途径 激活因子为脂多糖等 激活顺序为： C3 → C5 → C6 → C7 → C8 → C9 参与成分：B、D、P因子、C3、C5－C9 旁路途径的优势：在机体内产生抗体之前即可发挥作用，在感染早期的抗菌意义重大。 C3 H2O b B D C3 C3a b C3 convertase This C3b molecule has a very short half life b P C5 convertase C3 C3b C3bB C3bBb P.C3bBb C3b + P.Bb iC3b C3bBbC3b B因子 D因子 P H因子 I因子 ① H因子抑制剂 ② C3 攻膜阶段 细菌、真菌的细胞壁 肿瘤细胞膜 C5转化酶 C3转化酶 补体活化的旁路途径 C3bBbC3b裂解C5 C5a C5b, 与C6、C7结 合形成复合物 C5b67 C5b67结合于抗原表面，并自动吸附C8，形成C5b678 C5b678吸附C9，形成C5b6789，形成跨膜通道 与传统途径比较有2点不同： 不需求C1 、 C4和C2的参与，激活过程由另一组血清因子所实现。 诱因