实验六_坐骨神经腓肠肌标本的制备教程.ppt

坐骨神经腓肠肌标本制备 [学习目的] 1、学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。 2、学习并掌握蛙类（蟾蜍）坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法 实验方法 1.破坏脑和脊髓 2.剪除躯干上部及内脏 一手持手术镊轻轻提起耻骨联合上方的皮肤，另一手用手术剪横向剪开皮肤，再剪开体壁肌肉（开口要大）。然后用手术镊轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿损伤脊神经）。一手轻轻托起蟾蜍后肢，使头部及内脏向下，看清支配后肢的脊神经发出部位，于其前方用金冠剪横向剪断脊柱。然后再沿脊柱两侧到横向切口剪断体壁，一手用蘸有任氏液的拇指和食指捏住断开的脊柱后端，另一只手向后撕剥皮肤并除去断开脊柱以上部位肢体及内脏。 4.分离两后肢 用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉组织，并纵向剪开脊柱，使两后肢完全分离。 5.制作坐骨神经腓肠肌标本 将一侧后肢的脊柱端腹面向上，耻端向外侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本固定在蛙板上。 （1） 游离坐骨神经 （2）游离腓肠肌 一手捏住耻端，另一手用手术镊（尖头镊）在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线扎紧。提起结线，游离腓肠肌。 （3）分离股骨头或胫腓骨头 沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，再用金冠剪自膝关节向前刮干净股骨上的肌肉，保留1cm 股骨头并剪断股骨。 制备完整的坐骨神经—腓肠肌标本应包括：连有坐骨神经的脊柱骨、坐骨神经、腓肠肌、股骨头或胫腓骨头四部分。 6. 检查标本兴奋性 用手术镊轻轻提起标本的脊柱骨片，使神经离开玻璃板。再用将任氏液蘸湿的锌铜弓，将其两级接触神经如腓肠肌发生迅速收缩，则表示标本机能正常。 刺激强度与收缩反应反应的关系 一、实验目的 1、学习电刺激方法及肌肉收缩的记录方法 2、观察刺激强度、刺激频率与肌肉收缩反应的关系 3、观察骨骼肌单收缩、收缩的总和及强直收缩现象 二、实验原理 * * 实验对象 蟾蜍 实验器材和药品 蛙板、普通剪刀、手术剪、镊子、玻璃分针、滴管、培养皿、锌铜弓、任氏液。 3.剥皮 握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手握住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢的皮肤。 将剥干净的后肢放入任氏液中备用。清洗手及用过的手术器械。 用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经。 注意事项 1. 操作过程中，勿污染、压榨、损伤、过度牵拉神经和肌肉. 2. 勿频繁使用金属器械触碰神经. 3. 制备标本过程中需经常用任氏液湿润标本. 1、骨骼肌有许多运动单位，刺激强度不同，被兴奋的运动单位数不同，收缩的强度不同，随着刺激强度的增加，收缩强度也增加，当所有的运动单位都兴奋时，再增加刺激强度，收缩强度也不会增加。 2、两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本时，如果刺激间隔大于单收缩的时程，则出现两个分离的单收缩；如果小于单收缩的时程，则出现两个收缩反应的重叠，为收缩的总和。当同等强度的连续刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，如果后一个收缩发生在前一个收缩反应的舒张期时，为不完全强直收缩；后一个收缩发生在前一个收缩反应的收缩期时，各个收缩完全融合为完全强直收缩。 * * * 一手握住蛙或蟾蜍（可用纱布包裹蟾蜍躯干部），背部向上。用拇指压住蛙或蟾蜍的背部，食指按压其头部前端，使头端向下低垂；另一手持毁髓针，有两眼之间沿中线向后触划，当触及到两耳间的凹陷处（此处与两眼的连线成等边三角形）时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针由凹陷处垂直刺入，即可进入枕骨大孔。然后将针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以捣毁脑组织。如毁髓针确在颅腔内，实验者可感到针尖触及颅骨。此时的动物为单毁髓动物。在将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。彻底捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，然后瘫软如棉，此时的动物为双毁髓动物。 如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓。操作过程中应注意使蟾蜍头部向外侧（不要挤压耳后腺），防止耳后腺分泌物射入实验者眼内（如被射入，则需立即用生理盐水冲洗眼睛）。 可将双毁髓的动物腹面向上放入蜡盘中。一手持手术镊轻轻提起耻骨联合上方的皮肤，另一手用手术剪横向剪开皮肤，再剪开体壁肌肉（开口要大）。然后用手术镊轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿损伤脊神经）。一手轻轻托起蟾蜍后肢，使头部及内脏向下，看清支配后肢的脊神经发出部位，于其前方用金冠剪横向剪断脊柱。然后再沿脊柱两侧到横向切口剪断体壁，一手用蘸有任氏液的拇指和食指捏住断开的脊柱后端，另一只手向后撕剥皮肤并