【分生】第四章蛋白质合成分解.ppt

分泌型蛋白质翻译同步转运的主要过程： 见P102 （二）质膜蛋白质的靶向输送——由囊泡转移到细胞膜 质膜蛋白质合成时在粗面内质网上的跨膜机制与分泌型蛋白质的跨膜机制相似，但是，质膜蛋白质的肽链并不完全进入内质网腔，而是锚定在内质网膜上。 不同类型的跨膜蛋白质以不同的形式锚定于膜上。 （三）溶酶体蛋白质的定位 ——蛋白质6-磷酸甘露糖基化 （四）内质网膜蛋白的定位 高尔基体膜受体与蛋白质C端的 -KDEL-结合，定位到内质网膜。 （五）线粒体蛋白的定位 绝大部分线粒体蛋白质是由核基因组编码、在胞液中的游离核蛋白体上合成后释放、靶向输送到线粒体中的。 翻译后转运 （六）过氧物酶体蛋白质的定位 翻译后转运 （七）细胞核蛋白质的定位 翻译后转运 核定位序列（NLS) 核输入因子 Ran蛋白（小GTP酶） 第四节 蛋白质合成的调控 一、蛋白质合成速率的调节 （一）翻译起始的调控 1. 翻译起始因子的调控作用 2. 阻遏蛋白的调控作用 3. 5’-AUG的调控作用 4. mRNA5’端非编码区长度对翻译的影响 干扰素的作用机理 干扰素诱导的蛋白激酶 dsRNA （1） 干扰素诱导eIF2磷酸化而失活 ATP eIF2 ADP eIF2-P（失活） Pi 磷酸酶 （2） 干扰素诱导病毒RNA降解 降解mRNA dsRNA 干扰素 A A P A P PPP 2? 5? 2? 5? 5? 2?- 5?A A PPP ATP 2-5A合成酶 RNaseL RNaseL 活化 （二）mRNA稳定性对翻译的影响（三）小分子RNA对翻译的影响二、蛋白质降解速率的影响 * 它有两个主要功能域：一个是存在于N-端的高度保守的ATP酶结构域，能结合和水解ATP；另一个是存在于C-端的多肽链结合结构域。蛋白质的折叠需要这两个结构域的相互作用。 大肠杆菌的HSP70 (DnaK) ATP酶 肽链结合结构域 H2N EEVD-COOH Grp E 结合部位 DnaJ/HSP40 结合部位 大肠杆菌的HSP40 (Dna J)可激活Dna K中的ATP酶，生成稳定的Dna J -Dna K-ADP-被折叠蛋白质复合物，以利于Dna K发挥分子伴侣作用。在ATP存在的情况下，Dna J和Dna K的相互作用能抑制蛋白质的聚集。 Grp E，核苷酸交换因子，与Dna K的ATP酶结构域结合，使Dna K的构象发生改变、ADP从复合物中释放出来并由ATP代替ADP，从而控制Dna K的ATP酶活性。 在蛋白质的折叠过程中，HSP70还需2个辅助因子HSP40和Grp E。 大肠杆菌中的HSP70 反应循环 人类细胞中HSP蛋白质家族可存在于胞浆、内质网腔、线粒体、胞核等部位，涉及多种细胞保护功能：如使线粒体和内质网蛋白质保持未折叠状态而转运、跨膜，再折叠成功能构象；通过类似上述机制，避免或消除蛋白质变性后因疏水基团暴露而发生的不可逆聚集，以利于清除变性或错误折叠的多肽中间物等。 伴侣蛋白是分子伴侣的另一家族，如大肠杆菌的Gro EL和Gro ES（真核细胞中同源物为HSP60和HSP10）等家族。 其主要作用是为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成天然空间构象的微环境。 2. 热休克蛋白60家族(heat shock protein, HSP):又称为伴侣蛋白 当待折叠肽链进入Gro EL的桶状空腔后，Gro ES可作为“盖子”瞬时封闭Gro EL空腔出口。封闭后的桶状空腔提供了能完成该肽链折叠的微环境。 Gro EL-Gro ES复合物 Gro EL-Gro ES反应循环 (二) 蛋白质二硫键异构酶 多肽链内或肽链之间二硫键的正确形成对稳定分泌型蛋白质、膜蛋白质等的天然构象十分重要，这一过程主要在细胞内质网进行。 二硫键异构酶在内质网腔活性很高，可在较大区段肽链中催化错配二硫键断裂并形成正确二硫键连接，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象。 (三) 肽-脯氨酰顺反异构酶 多肽链中肽酰-脯氨酸间形成的肽键有顺反两种异构体，空间构象有明显差别。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶是蛋白质三维构象形成的限速酶，在肽链合成需形成顺式构型时，可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。 二、蛋白质合成后的加工 （一）一级结构的修饰 1. 肽链末端的修饰 2. 个别氨基酸的共价修饰 糖基化 、磷酸化、羟基化等 3.二硫键形成 例：鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 4. 多蛋白的加工 信号肽的切除、酶原的活化 5. 前体蛋白的加工 （二）空间结构的修饰 1.亚基聚合 具有四级结构的蛋