北大仪器分析-紫外可见分光光度法3概述.ppt

一、定性分析 二、纯度检查和杂质限量测定 三、单组分的定量方法 四、同时测定多组分的定量方法——计算分光光度法 五、结构分析 六、比色法 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目、位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 结构完全相同的化合物 完全相同的吸收光谱 吸收光谱相同的化合物不一定是同一个化合物。 方法: 对比法 将样品化合物的吸收光谱特征与标准化合物的吸收光谱特征进行比较，或与文献所载的紫外-可见标准图谱核对。 如果两者完全相同，则可能是同一种化合物； 如果两者有明显差别，则肯定不是同一种化合物 续前 1．对比吸收光谱的特征值 续前 2．对比吸光度或吸光系数的比值： 可消去浓度和厚度的影响 （适于不只一个吸收峰的化合物） 例： 续前 3．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 与文献比较 局限性: 紫外吸收光谱一般只有一个或几个宽吸收带，曲线的形状变化不多；不相同的化合物可以有很类似的甚至雷同的吸收光谱。 ?得到相同的吸收光谱时，应考虑到并非同一物质的可能性；而在两种纯化合物的吸收光谱有明显差异时，却可以肯定两物不是同一物质。 二、纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 2．杂质的限量检查 规定：在某波长下，A 不超过某值。 药物中的杂质： 制定一个允许其存在的限量 （与分析误差的存在相比较） A 最大值 A 峰 / A 谷 最小允许值 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 用0.05mol/L的HCL配制成2mg/mL的溶液，λ 310nm下测定。规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 三、单组分的定量方法 A = ?C l A~C（?一定）线性 注意要求： ?? 选择：吸收峰，? 大，A大，测定灵敏度高。 几个峰，选不易被其它物质干扰的、较高吸收峰。 不选光谱中靠短波长末端的吸收峰。 ?溶剂的极限波长：P209页表11-3 ?吸收池：透光性 （一）吸收系数法（绝对法） A = ?C l l，?， C = A/ ? l ?， 手册、文献 练习 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： (二)标准曲线法 绝对法 A 必须准确 会在一定范围内变化 ? A C 会产生比较大误差 A = EC l = K?C A ? KC 线性 续前 标准曲线法 示例 芦丁含量测定 （三）对照法 同样条件：?、C标、A标、A样 C样 A标= EC标 l A标/ A样= C标/ C样 A样= EC样 l C样（%）= C标? A样 / A标 续前 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定A为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 四、多组分样品的定量方法—— 计算分光光度法 理论基础 吸光度加和性 续前 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 续前 2．两组分吸收光谱部分