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7.降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析不正确的是（ ） A．Klenow酶是一种DNA聚合酶 B．合成的双链DNA有72个碱基对 C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接 D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因 基 因 工 程 复 习 基因 工程 蛋白质工程 工 具 实施 过程 应用 限制酶 载体 DNA 连接酶 1.获取目的基因 4.目的基因的 检测和鉴定 3.将目的基因导入 受体细胞 2.构建基因表达载体 (核心步骤) 基因文库 人工合成 PCR扩增 微生物：Ca2+处理 植物：农杆菌转化法等 动物：显微注射法 DNA水平：DNA分子杂交法 RNA水平：分子杂交法 蛋白质水平：抗原—抗体杂交 个体水平检测 质粒 噬菌体衍生物 动植物病毒 人类健康 植物 动物 抗除草剂、 抗虫、抗病、 抗盐碱等 改善产品品质 提高生长速度 生产药物 基因工程药物 基因诊断 基因治疗 E?coliDNA 连接酶 T4DNA链接酶 目的基因、启动子、 终止子、标记基因 年份 试题 分值 2008年 32题 8 2009年 34题 7 2010年 18题、27题 10 2011年 33题 8 2012年 13题、32题 11 2013年 15题、22题 5 2014年 23题 3 2015年 32题 9 高考中的基因工程试题 分析：1.历年江苏高考必考专题。以非选择题考查为主，分值比重较大。 2.主要考察的知识落点：PCR技术、限制酶的选择和使用、构建基因表 达载体、目的基因的转化、转基因生物的安全性等。 3.从已考过的题目看，部分题目难度超过中学教材，但大部分考点仍 基于教材，深化对基因工程的理解，争取得到更多的分数。 平均分值：7.625 学习过程： 1.基因工程的理论基础----DNA分子结构： (1)DNA分子是由两条 的 盘旋成双螺旋结构。 (2)DNA分子中的 和 交替连接，排列在外侧，构成基本骨架； 排列在内侧。 (3)两条链上的碱基通过 形成碱基对，A与T配对，G与C配对，遵循 原则。 (4)磷酸和脱氧核糖之间的化学键为 键，用 处理可切断，用 处理可连接。 (5)碱基对之间的化学键为 ，可用 断裂，也可 断裂。 2.基因工程的理论基础----DNA分子的复制 (6)条件：模板： ； 原料：游离的4种 ； 能量： ATP ； 酶： 、 等。 (7)特点：① ；② 。 (8)DNA准确复制的原因： ①DNA分子 ，为复制提供了精确的模板； ②通过 ，保证了复制能够准确地进行。 碱基 反向平行 脱氧核苷酸链 磷酸 脱氧核糖 氢键 碱基互补配对 磷酸二酯 DNA酶、限制酶 DNA连接酶、DNA聚合酶 氢键 解旋酶 加热处理 DNA的两条链 脱氧核苷酸 解旋酶 DNA聚合酶 边解旋边复制 半保留复制 碱基互补配对原则 独特的双螺旋结构 一、基础必记： 1.基因工程的概念：基因工程又称为 技术，是指在生物体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入 ，并使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的 的技术。 2.基因工程的工具——酶与载体： 基因操作的常用工具有