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美国医疗器械改进协会规定生物指示剂应在下列情况下使用: (1)新灭菌器装置后检查 (2)灭菌器大修后验收 (3)常规监测 每周(最好每天)1次 (4)灭菌人体移植器材(待培养结果阴性后，  器材才可使用) (5)周期性质量检测 美国所用标准测试包分两种： 吸水手术巾包 混装包 吸水手术巾包： 含16条吸水手术巾，外包以双层布  23cm×23cm×15cm(1.5 kg) 生物指示剂放于8与9条手术巾间中央 同时放化学指示卡于其侧 混装包：含棉布手术衣3件以上，吸水手术巾12条，30个纱布方，5个纱布卷，一条手术大单，外以布包两层。 30cm×30cm×50cm(4.5~5.5kg) 生物指示剂放于包中央 同时将化学指示卡放于其上方或下方隔一手术巾处 3.2.2 干热或消毒剂气体灭菌监测干热 菌片装入无菌试管(1片/管) 布于消毒器内各层对角线内、外角(2管/点)消毒剂 菌片装入布(纸)袋 布于器内各层最难达到灭菌处(或中央与  四角)的物品中间灭菌后，接种于营养肉汤中(消毒剂需含中和剂)，  37℃培养7 d(3 d初步看)设阴性、阳性对照 3.2.3 物品(手)表面消毒效果监测物品、手表面可染试验菌或用其含自然菌(1)物理因子或消毒剂气体： 菌片放入无菌平皿中(2片/皿)，小型染菌物品  直接布放 消毒器每层布放2份(内、外)~5份(中央、四角)(2)消毒液： 平皿或适当容器盛消毒液 菌片或小型染菌物品(手)浸泡消毒液中 对大型染菌物品表面喷消毒液 消毒后，对菌片或涂抹采样作活菌计数 设阳性(不消毒)、阴性对照 采样、活菌计数： 菌片投入含10 ml采样液试管中 物品、手在采样部位用棉拭往返涂擦2次， 将棉拭头放入含10 ml采样液试管中 振打试管以洗脱菌 取洗脱液培养48 h 计数菌落数 计算杀灭率 3.2.4 空气(自然菌)消毒效果监测消毒前、后分别用平板沉降15 min采样37℃培养48 h平板直径9 cm，距地面1.5 m布于中央、四角(≤30 m2布中央与对角线二角)有条件者可用FA-1型多级撞击式采样器 3.2.5 监测消毒液微生物污染取消毒液1.0 ml加入含9.0 ml相应中和剂试管中混匀取0.2 ml涂抹平板或0.5 ml倾注琼脂混匀20℃培养7 d：霉菌37℃培养72 h：细菌总数细菌总数(cfu/ml)=平板菌落数×20(或×50) 3.3 注意事项(1)检测化学消毒剂效果要用中和剂 消毒 加于采样液中 灭菌 加于培养基中(2)复方中和剂应注意成分间拮抗(3)中和剂应经试验证明合适 附表 XXX中和剂试验结果组 别 平均菌数(cfu/ml)消毒剂+菌液(片) 0 4.5 0.5[消毒剂+菌液(片)]+中和剂 20 0.5 4.5中和剂+菌液(片) 204 000(中和剂+消毒剂)+菌液(片) 168 000正常菌液(片)对照 202 000未接种菌培养基对照 0（接种平皿0.5 ml，结果为3次试验平均） 4 程序监测 依消毒或灭菌处理程序，作回顾性或前瞻性监测。 回顾性 据仪表的自动记录或工作人员的现场记录，判断是否达到消毒或灭菌的要求。 前瞻性 据拟灭菌物品原始污染菌量、灭菌处理方法的杀菌D值和灭菌保证水平(10-6)，设计处理剂量。 结 语 消毒与灭菌效果监测，尤其是生物监测，是一件技术性较强的工作，稍有差错即得不出正确的结论。因此，负责监测的工作人员责任心要强，要经过培训。 消毒与灭菌效果监测方法简介 在消毒与灭菌效果监测