实验一：植物基因组DNA提取讲述.pptVIP

植物基因组DNA提取 实验目的 了解离心柱型试剂盒法提取植物DNA的原理 掌握离心柱型试剂盒法提取植物DNA的方法 熟练掌握离心机的使用 实验原理 实验原理 本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心柱和独特的缓冲液系统 离心吸附柱中采用的硅基质材料可高效、专一吸附DNA，可最大限度去除植物细胞中杂质蛋白质及其它有机化合物。 实验仪器 离心机、移液枪、1.5ml EP管 试剂（试剂盒内容） 缓冲液GP1（提取缓冲液：提供 CTAB和高离子浓度等） 缓冲液GP2（提供适当的盐分与PH，使DNA附于柱上） 缓冲液GD（与GP2同，两次绑定，使漂洗不下来） 漂洗液PW 洗脱缓冲液TE 吸附柱CB3 收集管 操作步骤 1、取植物新鲜组织约100mg，加入液氮充分研磨。 2、将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700ul 65 ℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀后，将离心管放在65 ℃水浴20分钟，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。 3、加入700ul 氯仿，充分混匀，12000rpm离心5分钟。 操作步骤 4、小心地将上层水相转入一个新的离心管中，加入700ul缓冲液GP2，充分混匀。 5、将混匀的液体转入吸附柱CB3中，12000rpm离心30秒，弃掉废液。（吸附柱容积为700ul左右，可分次加入离心。） 6、