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第十章基因信息的传递 主要内容 DNA的生物合成 RNA的生物合成 蛋白质的生物合成 基因表达调控 第二节DNA的生物合成 第二节RNA的生物合成 蛋白质的生物合成体系 四、 参与蛋白质生物合成的其他组分 1. 氨基酰tRNA合成酶 2. GTP,ATP 3. 起始因子(IF) 4. 延长因子(EF) 5. 释放因子(RF) …… 或称为终止因子(TF) 3. 转录的DNA模板 细胞内DNA不是其全长都可作为转录模板 DNA双链中,可作为模板转录成 RNA 的一条链,称为模板链(或反意义链) 同一DNA双链中与模板链相对(互补)的一条链称为编码链(或有意义链),可见转录是不对称的 模板链=反意义链=负链 编码链=有意义链=正链 为何称模板链为反意义链 ,编码链为有意义链? 可从下图理解: 5 …GCA GTA CAT GTC …3 编码链 3 …CGT CAT GTA CAG …5 模板链 DNA 转录 5 …GCA GUA CAU GUC …3 mRNA 翻译 N … 丙 - 缬 - 组 - 缬… C 肽 比较编码链和 RNA 链的碱基序列可见,除了以U代T外,其余均一致。基因组序列均以编码链(正链)表示. 不对称转录的两方面含义 : 5 3 3 5 模板链(含结构基因) 编码链 DNA 分子上的一条链可转录,另一条不转录 模板链并非永远在同一单链上 1. 启动子(promoter) RNA 聚合酶与模板DNA结合的特定部位,是基因转录的开始部位。 一般可分为 两类 DDRP 能直接识别的启动子 需蛋白质辅助因子的帮助,DDRP 才能识别的启动子 (四)启动子及终止信号 确保转录精确而有效地起始的DNA 序列 原核生物启动子的3个功能部位 转录起始点, 常标以+1,第1个核苷酸为嘌呤核苷酸(A或G). 上游或下游, +或-表示 结合部位, 长度为7bp, 位于-10bp处,有一共有序列(-TATAAT-, Pribnow盒) RNA聚合酶的识别部位, 由约6bp, 位于-35bp, 也有共有序列(-TTGACA-) 编码链 5 3 启动子 5 MeGPPP RNA产物 原核生物启动子 转录起始部位 +1 基因转录区 -10区 TATAAT Pribnow 盒 结合部位 TGTTGACA -35区 识别部位 DNA 模板链 3 5 编码链 5 3 DNA 模板链 3 5 CCAAT CAAT盒 -70 真核生物启动子 RNA产物 转录起始部位 +1 基因 转录区 TATA TATA盒 -25 Hogness盒 结合部位 GAGCCACCC GC盒 (少数) 2. 终止信号(终止子) DNA分子中决定RNA聚合酶终止转录的特定碱基序列。 原核生物终止信号碱基组成特点 有反向重复序列 决定转录产物的回折形成茎-环(或称发夹)结构 AT富集区 GC富集区 反向重复序列 AT富集区 GC富集区 一般认为由终止子引导的转录终止是不依赖ρ因子的 (五) 转录过程 起始 延长 终止 (以大肠杆菌的转录为例) 1. 转录起始 形成转录空泡(DNA解链长约20bp) DDRP(σ亚基)辨认并结合于启动子部位 由DDRP催化,头2 个NTP直接在起始点形成 第一个磷酸二酯键(不需引物,由模板指导), 形成转录起始复合物 σ亚基脱落(参与下一轮转录) 由核心酶(α2ββ)催化链的延伸 第一个总是GTP 全酶( σα2ββ )-DNA模板(启动子)-pppGpN-OH 3 5 DNA 5 3 DNA 起始点 RNA聚合酶 pppG pppN pppN 5pppGpN 转录起始时pppGpN-OH的生成 CN 3 5 模板链 ` CN 3 5 模板链 进一步延长 起始 2. 链的延长 转录起始时形成的“转录泡”仍保留 RNA链的延长由核心酶催化 核心酶沿模板链3→5方向移动,RNA链按碱基配对规律沿5→3方向延伸 新生链与模板链形成杂化双链(该杂化分子结构不稳定,RNA链游离后,DNA双链重新形成) 随“转录泡”和DDRP不断移动(单链模板不断暴露),转录连续不断地进行 要 点 3. 转录终止 依赖 ?因子的终止 不依赖于?因子的终止 见前述 ? 因子的功能及右图 依赖 ?因子的 终止作用机理 作用机理:终止信号区特殊碱基 序列决定RNA形成发夹形二级结构, 这是阻止转录继续向下游推进的关键; RNA-DNA杂化双链不稳定因素 : DNA复性,RNA自身
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