(3)单克隆抗体制备过程中的两次筛选 第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为浆细胞,B为骨髓瘤细胞),筛选掉A、B、AA、BB型细胞。 第二次筛选:利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选,获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 1.区分DNA连接酶和DNA聚合酶、限制性核酸内切酶和解旋酶 (1)DNA连接酶连接两个DNA片段,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。 (2)限制性核酸内切酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在特定的位置断开,而解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 2.启动子≠起始密码;终止子≠终止密码 3.根据受体种类确定基因工程的受体细胞: (1)植物:植物体细胞或受精卵 (2)动物:受精卵或体细胞 (3)微生物:细菌。 注:目的基因导入受体细胞不是基因工程成功的标志,基因工程是否成功在于目的基因是否成功表达。 题组2 综合考查基因工程的应用及蛋白质工程 1.(2015·课标卷Ⅰ,40)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。回答下列问题: (1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的________,以其作为模板,在________的作用下合成________,获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。 (2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入
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