发酵工业与发酵工程_06发酵过程控制4-6节概述.ppt

第五节 补料的作用和控制 分批补料培养是先投入一定量底物装入罐内，到发酵过程的适当时期，开始连续补加碳-能源或氮源或其他基质，使发酵过程中，限制性底物浓度在罐内保持一定；发酵液体积达到最大工作体积时，终止发酵，醪液一次全部取出的发酵方法。 一、 分批补料发酵的优点 （1）可以解除底物抑制，产物反馈抑制，分解代谢产物抑制； （2）可避免菌体过量生长，能改善发酵液性质； （3）能有效控制菌浓度，菌体细胞的质量； （4）可作为理论研究的手段，为自动控制和最优化提供实验基础 。 （1）补充微生物能源和碳源； （2）补充菌体所需要的氮源； （3）加入某些微生物生长或合成所需要的微量元素或无机盐； （4）加入某些诱导酶的作用底物。 第六节 溶氧的影响和控制 溶氧是需氧发酵控制的重要参数之一，氧的溶解度很小，氧的溶解度仅为6.4mg /L ，只能保证氧化8.3mg葡萄糖，仅相当于常用培养基葡萄糖浓度的1‰。 溶氧大小对菌体生长和产物的性质和产量产生不同影响；例如，谷氨酸发酵时，通气不足会积累大量乳酸和琥珀酸； 2. 发酵过程的溶氧变化 发酵前期（生长期），菌体繁殖迅速，菌体摄氧率增加，醪液粘度上升，需氧量增加，溶氧下降。 发酵中期（静止期），需氧量在有所减少，菌体和发酵液粘度均达到峰值；溶氧在较低水平维持一段时间后，开始上升，菌体进入次生代谢物合成期； 3. 溶氧的控制 需氧方面：需氧量与菌体浓度，基质浓度和种类，培养条件有关。 供氧方面：提高氧的传递推动力和液相体积氧的传递系数速率；生产中常采用加大通气速率，或提高搅拌转速，或适当增加罐压； 通气可以供给大量的氧：通气量与菌种、培养基性质、培养阶段有关。 搅拌则能使新鲜氧气更好地与培养液混合，保证氧的最大限度溶解，并且搅拌有利于热交换，使培养液的温度一致，还有利于营养物质和代谢物的分散。 此外，挡板则有助于搅拌，发酵液为湍流状态，使其效果更好。 罐压方面，一般来说，若培养罐深，搅拌转速大，通气管开孔小或多，气泡在培养液内停留时间就长，氧的溶解速度就大，而且在这些因素确定下，培养基的粘度越小，氧的溶解速度也越大。 * * 第六章 发酵过程控制 微生物的代谢产物。 合成产物的一种基质。 反映微生物生长和发酵状况，可通过碳质量平衡来估算菌体生长速率和细胞量。 溶解在发酵液中的CO2对氨基酸、抗生素等微生物发酵具有抑制和刺激作用，对许多产物的生产菌亦有影响。 二氧化碳 第四节 CO2和呼吸商 CO2对菌体生长的作用：直接影响——排出CO2高于4%时，碳水化合物的代谢及微生物的呼吸速率下降。 1、CO2对菌体生长和产物形成的影响 CO2影响产物形成：阻碍基质分解和ATP生成，影响产物的合成。 产黄青霉菌接种到溶解不同CO2浓度的培养基中，发现： CO2分压0～8％时，菌丝主要是丝状； CO2分压15％～22％，则膨胀，粗短的菌丝占优势； CO2为0.008 MPa时，则出现球状或酵母状细胞，致使青霉素合成受阻，其比生成速率降低40％左右。 CO2影响菌体形态 CO2作用在细胞膜的脂肪核心部位。 HCO3-影响磷脂，亲水头部带电荷表面及细胞膜表面的蛋白质。 CO2对细胞的作用机制 大发酵罐中CO2的分压是液体深度的函数，10 m深的发酵罐在0.101 MPa气压下操作，底部CO2分压是顶部CO2分压的2倍。 CO2与发酵环境 对数期菌体生长速率与CO2释放率成正比 ： CER=QCO2·c（X） QCO2 ——呼出二氧化碳量，mmol CO2／(g干菌体·h)； c(X)——菌体浓度，g干菌体／L。 2. CO2释放率 测出耗氧速率OUR，计算出呼吸商RQ。 代谢情况不同，RQ不同： RQ=1，糖有氧代谢，生成菌体，无产物形成； RQ1.1，糖经EMP生成乙醇。 3. 呼吸商与发酵的关系 酵母发酵 以延胡索酸为基质，RQ=1.44； 以丙酮酸为基质，RQ=1.26； E. Coli 以琥珀酸为基质，RQ=1.12； 以乳酸为基质，RQ=1.02 以葡萄糖为基质，RQ=1.00。 不同基质，菌的RQ不同 青霉素发酵的理论呼吸商： 发酵早期，主要是菌生长，RQ1； 过渡期：维持菌体生命活动，产物逐渐形成，基质葡萄糖的代谢不仅仅用于菌体生长，RQ比生长期略有增加。 产物形成期：对RQ的影响较为明显，如产物还原性比基质大，RQ增加；产物氧化性比基质大，RQ就减少。 菌体生长0.909， 菌体维持1， 青霉素合成4。 不同阶段，RQ不同