发育生物学第五章受精概述.ppt

植物极半球的微管沿将来背腹轴的方向平行排列 皮质颗粒内含物中含有的蛋白质： 1）. 蛋白水解酶可以使卵黄膜与质膜间的联系分离；剪除卵膜上bindin的受体及与之结合的精子。 2）. 粘多糖：进入卵周隙吸水膨胀，使卵黄层向外隆起，形成受精膜（fertilization envelope ）举起。 3）. 过氧化物酶：皮层颗粒分泌的过氧化物酶通过交联相邻蛋白质的酪氨酸残基使受精膜变硬。 受精膜最先在精子入卵的位置形成，并向外扩张至整个卵细胞，从而阻止多精入卵。 4）. 透明质素（hyalin）：在卵外形成透明质层(hyalin layer)，它与卵裂中对分裂球的支持作用有关。卵细胞质膜突起的微绒毛深入到其基部。 海胆受精膜的形成及多余精子的移除 哺乳动物不形成受精膜，但皮质颗粒中释放的酶对透明带中的精子受体分子进行修饰，使之丧失与精子结合的能力，因此，称为透明带反应。 (半乳糖基转移酶 (GalTase)—可与ZP3分子上的N-乙酰葡糖胺结合 ，使精子G蛋白激活并诱导顶体反应。卵激活时皮质颗粒释放出来的N-乙酰葡糖酶能对ZP3上的GalTase结合位点进行修饰，由此阻断透明带外围的精子与受精卵结合。） 3、钙的作用 皮层颗粒反应的作用机制与顶体反应基本相似，Ca2＋作为细胞内信使发挥了及其重要的作用。研究证明，启动皮层颗粒反应的钙主要储存在卵细胞的内质网中，而不是卵外钙离子的内流。 卵细胞内的信号分子三磷酸肌醇IP3激活Ca＋的释放，而IP3的产生是与GTP结合蛋白或酪氨酸激酶相关的。 海胆卵细胞皮层颗粒周围的内质网 荧光抗体染色显示，钙离子释放通道位于皮层的内质网中。 海胆卵受精时释放的钙波从精子入卵点开始跨越整个卵 磷酸肌醇（inocitol phosphates）在钙离子释放过程中的作用 四、 卵子的激活机制 未受精的卵子是惰性的，细胞的呼吸活动、RNA的转录和蛋白质的合成处于或几乎处于零水平。只有受精的刺激才能唤醒其代谢的活跃进行。这一活化过程分为两个阶段： 一、早期反应（应答）：指从精卵接触到发生皮质反应的数秒钟内所发生的事件。 二、晚期反应（应答）：在受精开始后数分钟内发生的事件。 Model of possible pathway of egg activation in the sea urchin. 卵子激活的可能机制1 卵子激活的可能机制2 受精后利用卵细胞质中储存的mRNA迅速合成大量的蛋白质 海胆发育的最初几个小时内，多聚核糖体的比例迅速增加 五、遗传物质的融合 1. 雌雄原核的形成及融合 单倍体的精子核进入卵细胞后，解凝聚形成雄原核（male pronucleus），卵细胞核则形成雌原核（female pronucleus）。精核形成雄性原核的过程受到卵子的严格控制。精子入卵时线粒体与鞭毛在卵细胞内降解，因此线粒体基因一般认为是母源性的；但中心体是父源性的。 海胆雌雄原核的融合 海胆雄原核形成后旋转180o，其中心体位于雌、雄原核之间，装配成星体，连接并牵动雄原核与雌原核相互靠近，最后融合形成合子核（zygote nucleus）。 海胆雌雄原核的迁移 中心体发出的微管形成星光，连接并牵动雄原核与雌原核相互靠近 海胆雌雄原核的融合 哺乳动物雌雄原核的融合 哺乳动物精子入卵后，在卵母细胞胞质中谷胱甘肽的作用下精子染色体解凝聚。随着卵母细胞完成第二次减数分裂，雄原核增大，中心体产生星光，并向雌、性原核的方向迁移。雌雄原核彼此靠拢，在迁移过程中复制DNA。两原核相遇后，核膜解体，染色质浓缩成染色体，定位于纺锤体上。因此，在合子中观察不到真正的二倍体核，两细胞期才可看见。 人类受精过程中雌雄原核的运动 A:精子入卵，雄原核膨大，精子的尾在卵中； B:雌雄原核并排；C: 2细胞期，两个细胞中的核清晰可见。 2. 哺乳动物雌雄原核的不均等性 形成合子的雌雄原核所携带的单倍体基因组并不等同。一个尚未被了解的生物学进程选择性地沉默父本或母本来源的等位基因，即印记。目前已有60多个哺乳动物的印记基因得到克隆，这些基因在发育过程中起着重要的作用。 粪蝇父本的基因组是沉默的，仅表达来自母本的基因。 Imprinting 基因: 在卵子发生或精子发生过程中被打上了不同印记的基因。 由于印记不同，来源于雌核和雄核基因的表达模式也不同，即在胚胎发育过程中，有些基因仅来自于雄性的表达，而另一些基因仅来自于雌性的表达。 因此只有来自于精子和卵子的二倍体才能正常发育，而仅来自于雌核或雄核的二倍体胚胎则要在发育过程中夭亡。 正常对照（左）和两个雌原核发育成的胚胎（右） 3. 细胞质成分在受精后的的重组 卵细胞受精后