第二章抗体总结.ppt

天然抗原一般都是多价多特异性抗原 B细胞 抗体 禽流感病毒 多克隆抗体 单克隆抗体 单抗药物以靶向性强、副作用小等优势在癌症、自身免疫性疾病等领域应用广泛，在兽医临床诊断中应用广泛。 商品名 生产厂家 （恩利）Enbrel 安进 （美罗华）Rituxan 罗氏 （郝赛汀）herceptin 罗氏 （类克）Remicade 默克/强生 （阿达木）humira 雅培 （阿瓦斯汀）Avastin 罗氏 第八节?? 单克隆抗体 多克隆抗体(polyclonal antibody) 第一代抗体 一、单克隆抗体和多克隆抗体 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物,如:免疫血清（含多种特异性抗体）。 应用 免疫学检测 被动免疫治疗和紧急预防 存在问题 质量难以控制，不易标准化， 特异性差, 用于免疫学检测容易出现交叉反应。 单克隆抗体(monoclonalantibody, McAb) 第二代抗体 由单个B细胞克隆产生的、针对同一抗原表位的抗体。 特点： 高特异性、高均一性 应用： 广泛 项目 多克隆 单克隆 抗体产生细胞 多克隆型 单克隆性 抗体特异性 识别多种抗原表位 仅识别单一抗原表位 抗体种类 不同特异性、不同类别的混合物 同一类别、质地均一、结构一致 特异性与亲和力 批与批之间不同，个体间有差异 特异性高，亲和力一致 与其它抗原交叉反应 常有 无 其他血清蛋白 较多 少或仅有小牛血清 与抗原发生沉淀反应 有 无 McAb和多克隆抗体的比较 单克隆和多克隆抗体的比较及用途 特异性 敏感性 均一性 McAb PcAb 低 差 无 高 强 有 1、用于免疫学检测，辅助临床诊断 2、McAb用于亲和层析，分离微量可溶性抗原 3、标记的McAb用于基础研究，了解细胞分化等 4、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。 二、淋巴细胞杂交瘤技术 1975年，由Kohler和Milstein建立 1984年，获诺贝尔奖 免疫的淋巴细胞： 具有合成分泌抗体的功能 但不能在体外生长。 骨髓瘤细胞：不能合成或分泌Ig。 具有在体外长期连续继代的特性。 1. 原 理 骨髓瘤细胞 致敏的B淋巴细胞 杂交瘤 杂交瘤细胞：合成抗体、能在体外长期连续传代 2.单抗技术流程 3 杂交瘤细胞的选择性培养 DNA合成的途径： 糖+氨基酸 氨基喋呤 (Aminopterin,A) 胸腺嘧啶核苷 (Thymidine,T) TMP 核苷酸 DNA 核苷酸前体 次黄嘌呤 (Hypoxanthine, H) HGPRT(磷酸核酸转移酶) IMP 脾细胞(指B细胞)? 在一般培养基中不能生长繁殖，死亡； 骨髓瘤细胞：小鼠骨髓瘤细胞都是HGPRT代谢缺陷型细胞，死亡； 杂交瘤细胞：存活 TK 三. 单克隆抗体的特性 高度均一性： 纯度很高的均一性抗体 高度专一性： 只对抗原分子上某一抗原决定 簇起反应 大量产生及稳定性： 杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖之传代 鼠源单抗作为异源性蛋白在人体内可诱发抗鼠抗体的生成，可产生毒性反应，并使mAb在体内消除加快，这严重影响了鼠单抗的治疗效果。 嵌合抗体 （分子中仅V区是小鼠的，其余是人源的） 人源抗体 （分子中仅CDR是小鼠的，其余是人源的） Fab 单链抗体 双特异性抗体 基因工程抗体(GeAb): 第三代抗体：由基因重组技术制备的抗体 双特异性抗体抗肿瘤作用机制 本章小结 △ IL-4 肥大细胞或嗜碱性粒细胞 Fce R Th2 APC BCR IgE 粘膜下腺 血小板 平滑肌细胞 小血管 释放介质 变应原 脱颗粒 致敏肥大细胞或 嗜碱性粒细胞 产生IgE 临床症状 肥大细胞或嗜碱性粒细胞 记忆性B-C B-C Fc受体 BCR Ag Ag Ag * 异常免疫球蛋白，如多发性骨髓瘤蛋白，又称为L链蛋白或本周氏蛋白。早在1847年，Bence Jones在多发性骨髓瘤疾病患者的尿液中成功地捡出一种蛋白，称为Bence Jones氏蛋白，它本身是抗体的片断（L链），还有其他患者血清中的免疫球蛋白，这种蛋白不易查到抗体活性。 * * 类 亚类