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第四章 消毒与灭菌 主要内容: 物理因素对微生物的影响 化学因素对微生物的影响 生物因素对微生物的影响 概 念 1、杀菌作用(bacteriocidic action)指某些物质或因素所具有的在一定条件下杀死微生物的作用。 2、抑菌作用(bacteriostatic action)指某些物质或因素所具有的抑制微生物生长与繁殖的作用。 3、抗菌作用(antibiotic action)指某些药物所具有的抑制或杀灭微生物的作用。 4、灭菌(sterlization)指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子的方法。 5、消毒(disinfection)指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。用于消毒的化学物质称消毒剂。 6、防腐(antisepsis)指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。用于防腐的化学物质称防腐剂。 7、无菌(asepsis) 指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的方法,称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌技术或无菌操作。以无菌技术剖腹产取出分娩胎儿,并在无菌条件下饲喂的动物,称无菌动物。 8、SPF动物:以无菌方法取出,饲养在相对封闭的环境中,动物明显健康,无规定疫病病原。 第一节 物理因素对微生物的影响 一、温度 不同温度对微生物生命活动呈现不同的作用。适当的温度有利于微生物的生长发育,但温度过高或过低都会影响微生物的新陈代谢,生长发育受到抑制,甚至使之死亡。 1、低温 大多数微生物对低温具有很强的抵抗力,当微生物处于最低生长温度以下时,其代谢活动降低到最低水平,生长繁殖停止,但仍可长时间保持活力。所以,常用来保存细菌。温度愈低病毒存活的时间也愈长。也有些细菌如脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对低温特别敏感,在冰箱内保存比在室温下保存死亡更快。 冷冻真空干燥(冻干)法是保存菌种、毒种、疫苗、补体、血清等的良好方法,可保存微生物及生物制剂数月至数年而不丧失其活力。其采用迅速冷冻和抽真空除水的原理,将保存物置于玻璃容器内,迅速冷冻使溶液中和菌体内的水分不形成冰晶,然后抽去容器内的空气,便冷冻物中的水分在真空下因升华作用而逐渐干燥,最后在真空状态下对玻璃容器严密封口。 2、高温 高温对微生物具有明显的致死作用,因此最常用于消毒和灭菌。用高温处理微生物时,可对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生直接破坏作用,热力可使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固,使双股DNA分开为单股,受热而活化的核酸酶使单股的DNA断裂,导致菌体死亡。 热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两类。 在同一温度下,后者效力比前者为大,这是因为湿热中菌体蛋白较易凝固。蛋白质含水量愈高,凝固所需的温度愈低;其次湿热的穿透力比干热强;而且蒸汽可以释放大量潜热,可迅速提高被灭菌物体的温度。 超高温巴氏消毒法: 在132℃保持1~2s,加热消毒后应迅速冷却至l0℃以下,称为冷击法,这样可进一步促使细菌死亡,也有利于鲜乳等食品马上转入冷藏保存。超高温巴氏消毒的鲜乳在常温下,保存期可长达半年。 * 西南民族大学 * 在低温状态下真空抽去水分 用途:保存菌种 冷冻真空干燥法: ? 热力灭菌法 高温杀灭细菌 焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160-180℃ 2小时 干热灭菌法 湿热灭菌法 加压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121 ℃ 20~30分钟 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 巴氏消毒法 间歇蒸汽灭菌法 水蒸汽100 ℃ 15~30分钟(繁殖体) 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 较低的温度(61 ℃ 30分钟)杀灭致病菌 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下,湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3 、湿热的蒸汽有潜热 * 西南民族大学
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