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课题1微生物的实验室培养教程
细菌的外形与大小 细菌:单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明,通常用适当染料染色后显微镜观察 细菌的构造 细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。 *细胞壁 结构特点:坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能? ①固定细胞外形; 菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 朊病毒(蛋白质病毒) 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。 自养菌(autotroph) 异养菌(heterotroph) 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 ②合成培养基 是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的。 一、基础知识 (一)培养基 1. 概念: 2. 种类 3.营养构成 3.营养构成 (1)主要营养: 虽然各种培养基的 具体配方不同, 但一般都含有 水、碳源、氮源和无机盐。 在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 (2)另外需要: 培养乳酸菌加维生素, 培养霉菌调pH至酸性, 培养细菌调pH至中性微碱性,培养厌氧菌提供无氧条件。 一、基础知识 (一)培养基 (二)无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌技术泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。 (二)无菌技术 一、基础知识 (一)培养基 1.无菌技术的概念 2.主要包括一下几个方面: 2.主要包括一下几个方面: (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 (二)无菌技术 一、基础知识 (一)培养基 1.无菌技术的概念 2.主要包括一下几个方面: 3.消毒和灭菌 3.消毒和灭菌 (1)消毒: 指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部部分对人体有害的微生物。(不包括芽孢和孢子)。 (2)灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而达到完全无菌之过程。 枯草芽孢 在一定条件下,细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。 (二)无菌技术 一、基础知识 (一)培养基 1.无菌技术的概念 2.主要包括一下几个方面: 3.消毒和灭菌 4.实验室常用的消毒和灭菌方法 4.实验室常用的消毒和灭菌方法 (1)消毒方法 ①煮沸消毒法: 在100℃煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢。 ②巴氏消毒法: 对于一些不耐高温的液体,如牛奶,在70-75 ℃煮30min或在80 ℃煮15min,可以杀死牛奶中的微生物。 (1)消毒方法 ③化学药剂消毒法: 用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源。 (1)消毒方法 ④紫外线消毒: (1)消毒方法 空气 ⑤化学药物消毒: (1)消毒方法 双手。 (2)灭菌方法 ①灼烧灭菌: ②干热灭菌: ③高压蒸气灭菌: (2)灭菌方法 培养皿 培养基 单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子 杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒 低效消毒法 超声波、碘类、醇类、酚类 杀灭除芽孢外的致病微生物 中效消毒法 紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等 杀灭一切致病微生物 高效消毒法 物理法:热力、辐射、微波、等离子体 化学法:醛类、烷化剂 杀灭一切微生物 灭菌法 方法 定义 分类 无菌技术 旁栏思考 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 * 微生物是一切肉眼看不见(但有些微生物是可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)或看不清的微小生物,个体微小(一般0.1mm ),结构简单(有单细胞的,简单多细胞的,非细胞的),通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。 微生物 1.概念: 微生物 1.概念: 2.分类: 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 微生物包括 五类: 原核生物界 病毒界 真菌界 原生生物界 原核类:三菌,三体。 三菌:细菌、蓝细菌、放线菌 三体:支原体、衣原体、立克次氏体 真核类: 真菌
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