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染色体工程 染色体工程的定义: 染色体工程(chromosomal engineering) 是指按照人们的预先设计,通过附加、代换、削减和易位等染色体操作方法和技术改变物种染色体组成,进而定向改变其遗传特性的新技术。有时人们也把这种技术称为染色体操作(chromosomal manipulation) ,它是染色体水平上的细胞工程。 对于染色体数的操作是通过杂交进行的,而随着近年来植物细胞组织培养及染色体操作等技术的不断进步,通过花粉培养育成单倍体及采用PEP等减数化处理,由分离的染色体移植产生异倍体及基因的部分导入,染色体基因测绘等,包括各种各样的内容的操作技术,已经可以进行了. 一.从培养细胞分离染色体 染色体的分离,可能在细胞分裂期开始进行,因 此,染色体能够分离的植物体的部位是茎尖及根尖分生组织,或者仅限于花粉母细胞和卵细胞等生殖器官的细胞.以往染色体分裂,大部分是用细胞培养来进行的. 对用细胞培养提取染色体时的条件是: ①迅速增殖细胞培养系的建立; ②细胞分裂的同步化; ③从分裂中期细胞原生质体的分离; ④要提出确定的染色体精制方法等. 二.由花粉母细胞分离染色体 减数分裂期染色体的一般提取步骤是: ①由花粉母细胞通过适当的酶液分离原生质体; ②把获得原生质体在低渗透压的缓冲液中破坏以后； ③通过适当的缓冲液和离心操作重复进行几次提取染色体，这是一种精制的方法 。 三.染色体的识别和鉴定 染色体的识别和鉴定的正确而传统的手段是核型分析法，所以通常通过对各个染色体的长度，着丝点的位置，髓体的有无等来进行识别。 荧光染色法，C光谱带法等通过利用染色体部位染色性的不同性质，从各个染色体表现浓淡的谱带的差别进行识别，已经广泛得到认可了。 四. 染色体的划分 如果可以把构成种的染色体组划分成各个相同染色体并可进行各种染色体的转化作用．那么，也就可以了解特定基因在染色体上的位点，这就成了绘制基因图的最有力的手段．就此，使最终的特定基因的分离和无性系繁殖就变得更容易了． 五.染色体导入 由于细胞壁的存在把染色体直接导入植物细胞是不可能的。因而应该采用原生质体，这种情况，在动物细胞上似乎采用了染色体和细胞长时间孵出的方法，不防碍在短时间引起细胞壁的再生。 对细胞融合通过用PEG处理，引起染色体的导入率在10-４ ～ 10-５ 之间．　　　 六．通过微小核细胞导入少数染色体 培养细胞一经秋水仙碱处理就暂时停留在分裂中期像，随着处理时间的延长染色体中就有一群向分裂终期像移动，各群分别被包上核膜，就形成在一个细胞内具有复数的微小核状态．由于微小核的形成和处理时间同时增加，所以在某一时间原生质体化后，把这些微小核搜集出来，一个微小核中包含染色体的种类及数量是没有规律性的，哪个染色体被包含在哪儿，鉴定是困难的． ＤＮＡ作为直接受体被放出，使分解率增高．因而染色体不可能完全导入，即使仅仅导入部分基因也是好的．为了解决这样的缺点，把微小核包上细胞膜就形成细胞，把这些和受体细胞原生质体融合的方法，即如果是微小核细胞，和变成受体的原生质体融合，则把少数的染色体作为微小核导入是可能的． 一般认为ＣＩＰＣ是不引起染色体自身异常分裂抑制剂，能引起体细胞分裂异常，作为获得染色体的减数及单倍体的手段已经引起人们注意． 七．转化作用体的选择 通过染色体导入使转化作用达到目的时，导入原生质体的染色体效率是极低的，由于一般原生质体自身分裂增值率也不太高，所以这样的细胞系的利用是必要而不可缺少的条件． 总结 　　　 染色体是生物细胞核中最重要而稳定的成分,它具有特定的形态结构和一定的数目,具有自我复制能力,并积极参与细胞的代谢活动,能出现连续而有规律的变化,是决定物种繁衍的遗传物质的载体。如果染色体在数量、结构、功能等方面发生变异,最终都会导致生物遗传性状的改变　　 　　　 　　　 为了弄清分离染色体的导入，转化作用及染色体上的基因位置，在动物细胞上已经有了一般的成功技术，然而，对于植物细胞，采用染色体转化作用成功之例还尚不知晓． * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *