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E-mail:1223wxj@163.com QQ:719455374 课题1 菊花的组织培养 活动1: 什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果? 愈伤组织是怎样形成的?有什么特点? 组织培养的过程?以及组织培养的理论基础? 脱分化、再分化? 影响组织培养的因素? 菊花组织培养的过程,及注意的问题? 是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株的技术。 组织培养 1、细胞分化的原因是什么? 在特定的时间和空间条件下,基因的选择性表达。 思考: (一)植物组织培养的基本过程 细胞分化 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程 植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的? 没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养的基本过程 愈伤组织 愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 (二)影响植物组织培养的因素 材料的选择、营养成分、激素、一定的外界因素(温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等)。 MS固体培养基成分及比例 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 阅读课文,思考以下问题 1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么? 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素。 激素配比对组织培养的影响 在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。 高 利于根分化、抑制芽的形成 生长素/细胞分裂素 低 利于芽的形成 适中 利于愈伤组织的形成 活动2: 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?(提示:怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ) 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 结合录像外植体灭菌与接种操作,谈谈组织培养污染的主要途径及怎样预防污染? 污染的预防措施 (一)防止外植体带菌 (二)保证培养基及接种器具彻底灭菌 (三)操作人员严格遵守无菌操作规程 (四)保证接种与培养环境清洁 试评价下列操作正确与否 本课题内容小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化 细胞全能性 组织培养过程 营养 激素 环境条件 MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 * 7营养:常用的培养基是MS培养基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。[来源:Zxxk.Com] 激素:在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。 配制各种母液:将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数,计算用量,并加蒸馏水稀释。 2.2配制培养基:应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,并用蒸馏水定容到1000毫升。在菊花组织培养中,可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比较容易。 2.3灭菌:采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。 E-mail:1223wxj@163.com QQ:719455374 愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 * 7营养:常用的培养基是MS培养基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。[来源:Zxxk.Com] 激素:在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。 配制各种母液:将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数,计算用量,并加蒸馏水稀释。 2.2配制培养基
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