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教材经典实验归类
一. 观察DNA和RNA在细胞中的分布 (必修一P26)
实验原理:DNA遇甲基绿呈绿色,RNA可被吡罗红染成红色。
实验步骤
步骤 器材与试剂 作用与原理 (1)制片 ①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴
②载玻片烘干 1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂,
维持细胞形态。
2 烘干使细胞固定在载玻片上 (2)水解 8%HCl中30℃保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。 (3)冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟 (4)染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色
吡罗红使RNA染上红色 (5)观察 显微镜下观察 实验结果:细胞核呈绿色,。
实验原理:可溶性糖中的还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖),与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色的CU2O沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。(蛋白质中的肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色络合物)
1.还原糖的检测
还原性糖:有还原性基团——游离醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖。
(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。
(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
2.脂肪的检测
(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3.蛋白质的检测
(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤:试管中加样液2mL → 加双缩脲试剂A液1mL,摇匀 → 加双缩尿试剂B液4滴,摇匀 → 观察颜色变化(紫色)
【注意事项】
1.还原糖检测:①选材要用含糖较高、颜色为浅色 的生物组织提取液;②使用斐林试剂时必须将甲、乙两液等体积混合均匀,切勿分别加入组织样液中进行检测。加入斐林试剂后,需要水浴加热。
2.脂肪检测:①切片要尽可能的薄(实验时也可刮取组织碎屑);②染色后一定要用50%的酒精处理,目的是洗去浮色;③观察时找最薄处,最好只有1~2层细胞。
3.蛋白质检测:双缩脲使用时,应先加1mL A液造成碱环境,再加4滴B液。
4.斐林试剂与双缩脲试剂的区别.
三.用高倍镜观察线粒体和叶绿体 (必修一P47)
1.材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片
2.原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,
用健那绿染液染色后的活细胞中线粒体成蓝绿色,
步骤 操作方法 目的与作用 (1)取材 ①新鲜的藓类的叶
②菠菜叶下表皮略带一些叶肉 ①藓类叶为单层细胞
②下表皮容易撕取,要略带些叶肉 (2)制片 注意叶片不能太干了,保持有水的状态 以免影响细胞活性 (3)观察 叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源,在强光下以最小面积(短轴)转向光源。 (1)取材 漱口,口腔内侧壁上轻刮几下 (2)染色 将口腔细胞放在健那绿液滴上 (3)观察 盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色
问题 1.为什么不用植物细胞来观察线粒体?
植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。
2.如果观察发现染色不足,如何补色?
在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸。 注意:
①临时装片保持有水状态。②因叶绿体本身含色素,呈绿色,观察时不需染色。
③健那绿是活细胞染色剂。
四.观察植物细胞的质壁分离和复原(必修一P61)
原理:①细胞液浓度细胞外溶液浓度时,细胞吸水;细胞液浓度细胞外溶液浓度时,细胞失水 ②细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。
1.条件:细胞内外溶液浓度差,活细胞,大液泡
2.材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3.步骤: 制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一側滴蔗糖溶液,,,)
→盖玻片一側滴清水, 另一側用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4.结论:细胞外溶液浓
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