1微生物的实验室培养555讲述.ppt

病毒 原核微生物 真核微生物 2、培养基的营养构成及所需其它条件 鉴别培养基 选择培养基 1、碳源 2、氮源 3、生长因子 3、培养基的配制原则 鉴别培养基 选择培养基 ②涂布分离法:是指将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等. 结果分析与评价 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同 （一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 菌种的保藏 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 本课题知识小结: 1.提示：可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。例如，微生物的生长需要水、空气、适宜的温度，食品保存可以通过保持干燥、真空的条件，以及冷藏等方法来阻止微生物的生长。 2.提示：可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。例如，这三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养，但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件，而其他两种技术都要求严格的无菌条件。 3.提示：这是一道开放性的问题，答案并不惟一，重点在于鼓励学生积极参与，从不同的角度思考问题。例如，正是由于证明了微生物不是自发产生的，微生物学才可能发展成为一门独立的学科；巴斯德实验中用到的加热灭菌的方法导致了有效的灭菌方法的出现，而这一灭菌原理也适用于食品的保存等。 无机碳源： 有机碳源： CO2 、NaCO3等 糖类、脂肪酸、花生粉饼等 3）功能： a、主要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物 b、有些有机碳源是异养型微生物的主要能源物质 2）类型： 4）特点： 最常用的碳源是糖类，尤其是C6H12O6 碳源的需求量最大但不同微生物对碳源的要求差别很大 1）定义： 凡能为微生物的生长繁殖提供所需碳元素的物质 1）定义： 2）类型： 3）功能： 4）特点： 凡能为微生物的生长繁殖提供所需氮元素的物质 无机氮源： 有机氮源： N2 、NH3、NH4+、NO3-等 尿素、牛肉膏、蛋白胨等 用于合成蛋白质、核酸、以及含氮的代谢产物 最常用的氮源是NH4+、NO3- 附： NH3是硝化细菌的氮源和能源物质 1）定义： 2）种类： 3）功能： 4）特点： 某些微生物生长不可缺少的微量有机物 维生素（V）、氨基酸、碱基、胺类、固醇等 一般是酶和核酸的组成成分 微生物自身不能合成或合成能力有限 特殊营养物质 4、 水和无机盐 构成微生物酶的组成成分、调节渗透压等 良好溶剂、生化反应介质 5、此外还应满足微生物对pH以及氧的要求 1）目的要明确 2）营养要协调 在谷氨酸生产中，当培养基中C:N=4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸减少 在谷氨酸生产中，当培养基中C:N=3：1时，菌体繁 殖受到抑制而产生的谷氨酸增多 3）pH要适宜 细 菌： 最适pH为6.5---7.5 放线菌： 最适pH为7.5---8.5 真 菌： 最适pH为5.0---6.0 4、培养基的种类和作用 * * 专题2 微生物的培养和应用 细菌 蓝藻 放线菌 支原体 立克次氏体 衣原体 酵母菌 霉菌 蕈菌（蘑菇） 病毒几乎可以感染所有的细胞生物，并具有宿主特异性 噬菌体（phage） 植物病毒（plant viruses） 动物病毒（animal viruses） 病毒培养 动物接种 鸡胚接种（常用的病毒培养法之一 ） 组织培养（应用最广的方法 ） 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 芽孢又小又轻，可以随风飘散。 当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 芽孢：椭圆形的休眠体 二、培养基 人们按着微生物