基础学习02章核酸结构与功能new2讲述.ppt

解链曲线：在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 Tm：紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 　热变性的DNA在复性过程中，具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象。 核酸分子杂交 (hybridization)： 变性 复性 复性 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 第五节 核 酸 酶 Nuclease 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase) RNA酶 (ribonuclease, RNase) 依据切割部位不同分类 核酸内切酶： 限制性核酸内切酶 非特异性核酸内切酶 核酸外切酶： 　　5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 体外重组DNA技术中的重要工具酶 生物体内的核酸酶负责催化细胞内外核酸的降解 核酸酶的功能 核 酶 催化性DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。 催化性RNA (ribozyme) 　序列特异性的核酸内切酶 　参与RNA转录后加工修饰 　作为针对病毒或肿瘤基因的药物降解mRNA。 * * * * * * 意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 （二）原核生物DNA的高级结构 （三）DNA在真核生物细胞核内的组装 真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体(nucleosome)。 核小体的组成 DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4 串珠状核小体结构 Apoptosis(凋亡）and Chromatin degradation---DNA ladders 凋亡(apoptosis)或程序化死亡的显著特征是细胞内出现凋亡小体(apoptotic body)。凋亡小体的出现是由染色质DNA断裂所致。染色体DNA断裂后形成许多长度约为n x (180-200)bp (n=1,2,3,4…) 的DNA片断的电泳照相显示为阶梯状，成为调亡DNA Ladder，是细胞凋亡的无可争辩的特征。 160-200bp 160-200bp DNA ladders Nucleosomes cut by Enzyme 串珠状核小体 DNA双螺旋片段 染色质纤维 伸展形染色质片段 密集形染色质片段 整个染色体 核小体 螺线管 真核生物染色体DNA组装 三、DNA的功能 DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。 基因从结构上定义，是指DNA分子中的特定区段，其中的核苷酸排列顺序决定了基因的功能。 第三节 RNA的结构与功能 Structure and Function of RNA 动物细胞内主要RNA的种类及功能 一 、信使RNA的结构与功能 hnRNA 内含子 (intron) mRNA * mRNA成熟过程 外显子 (exon) * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸 (polyA)结构，称为多聚A尾。 帽子结构 mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 mRNA的功能：作为蛋白质合成的模板。 * tRNA的一级结构特点 含稀有碱基较多 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 由70~90个核苷酸组成 二、转运RNA的结构与功能 稀有碱基 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 额外环 * tRN