血红蛋白的提取和分离研讨.ppt

* 血红蛋白含有四条肽链,每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，每个基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳，血红蛋白因含有血红素而呈红色。 课题3 血红蛋白的提取和分离 一、基础知识: 预习提纲： 1.不同蛋白质的特性在哪些方面存在差异？蛋白质的提取和分离的方法有哪些？ 2.凝胶色谱法分离蛋白质的原理是什么？ 4.什么事缓冲液？它的作用是什么？ 3.凝胶电泳法分离蛋白质的原理是什么？ 一、蛋白质提取和分离原理 蛋白质的物理化学性质： 形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、 亲和力等千差万别。 提取分离方法 凝胶色谱法 (凝胶)电泳法 (一)凝胶色谱法 （1）原理 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。 （2）分离过程（简述） 混合物 上 柱 洗 脱 大分子流动快 小分子流动慢 收 集 大分子 收 集 小分子 (一)凝胶色谱法 1.原理： 不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小 不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向 和运动速度不同。 (三)电泳--凝胶电泳法 二、实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步： （1）样品处理：包括洗涤红细胞；血红蛋白释放；离心分离等操作收集到的血红蛋白溶液。 （2）粗分离：透析除去分子较小的杂质。 （3）纯化：通过凝