中国海洋大学生物工程—基因工程总结.pptVIP

病毒（噬菌体）的生长繁殖 动物病毒 单纯疱疹病毒 艾滋病病毒 植物病毒 HIV结构 入侵，破坏人体免疫细胞（系统） SARS(重症急性呼吸综合症)病毒 性质 60-220nm 有被膜 正链RNA, 单链RNA 飞沫传播 人类呼吸道和消化道最易传染！ 人工载体 Cosmid（柯斯质粒，黏粒）： 综合天然载体优点。 人工“剪接”成质粒或病毒 目的基因 一、获取途径 化学合成 DNA文库法 （注意两种文库的区别） PCR技术 目的基因转入载体 二、连接 粘性端的退火 连接酶 受体细胞 微生物 转化、转染、转导 动植物 物理方法：显微注射、基因枪、脉冲电 化学方法：共沉淀、脂质体、转染 生物方法：病毒、原生质体 根据受体和产品选择。 筛选与表达 筛选方法 1、耐药性标记 2、标记补救——除去原有标记 3、分子杂交 4、PCR 5、免疫 6、序列分析 防止变异和出现不合格产品！ 转基因食品 基因工程 示意图 本章重点 基因工程确立的历史事件 基因工程、遗传工程和DNA重组技术的概念区分 基因工程的基本过程及四大要素 PCR技术的基本原理 作业：有8（10）个外观相同的球，已知其中一个重量与其它7个不同。用一架天平秤3次，找到这个球，并知道其比其它球轻还是重。如何秤？ * 想一想不涉及生物问题的行业。 * 历史背景 基本原理 一、三大理论发现及三大技术发明 二、基本概念的厘清 三、基本过程：切、接、转、增、筛、检 四、四大要素：目的基因、载体、受体细胞、工具酶 具体阐述 一、工具酶，重点：限制性内切酶（实现切、接） 二、载体，重点：质粒、噬菌体、黏粒及人工载体（实现转，使增有可能） 三、目的基因，重点：获取 四、受体细胞，重点：导入方法 五、筛选、检验方法及克隆基因的表达 * 三大理论与三大技术奠定了DNA重组技术诞生的基础 * Grifith认为那些加热杀死了的S型细菌的存在导致那些活的R型细菌发生转化作用。后来，T.Avery进一步弄清了转化因子的本质是（将S型的DNA加到R型培养物中，使R型转化为S型。）1934年， T.Avery 在美国的一次学术会议上报道了他的研究结果，证明了DNA是生物的遗传物质，也证明了DNA可以把一个细菌的性状转化给另一个细菌。但这一超越时代的科学成就在当时未得到公认，十年后才得到公开发表。现在认为， T.Avery 的工作是基因工程的先导。 * 四大要素之三：载体（质粒）、受体细胞、工具酶 * Here are the contents. After an introduction of photoregulation of biofunction, I will talk about our basic idea, the,,,,,,. Then the applications in biology and nanotechnology. At last a brief summary and prospect. At first, the introduction. * 10‘5：1mmと100 m、100mと地球。物質は分子の集団です。溶液は気体と相当する。空気は44.6mMもある。 酸素9.34 mM, 窒素36.1mM, ＣＯ２は14.3uMになります。Ｈ２は29 nM, COは4.5 nM, O3は1.34 nM. 化学は、分子と分子反応して、新しい分子を。。。 * 一年级新生不了解涂平板等简单的微生物操作实验。 大学以前接触的实验太少。 * 历史背景 基本原理 一、三大理论发现及三大技术发明 二、基本概念的厘清 三、基本过程：切、接、转、增、筛、检 四、四大要素：目的基因、载体、受体细胞、工具酶 具体阐述 一、工具酶，重点：限制性内切酶（实现切、接） 二、载体，重点：质粒、噬菌体、黏粒及人工载体（实现转，使增有可能） 三、目的基因，重点：获取 四、受体细胞，重点：导入方法 五、筛选、检验方法及克隆基因的表达 * 具体阐述 一、工具酶，重点：限制性内切酶（实现切、接） 二、载体，重点：质粒、噬菌体、黏粒及人工载体（实现转，使增有可能） 三、目的基因，重点：获取 四、受体细胞，重点：导入方法 五、筛选、检验方法及克隆基因的表达 * 用途径动画。以GAATTC为例。 * Vector 噬菌体的溶原性和溶菌性，天然黏性 * 图片和细致解释 * 一、获取途径 cDNA的定义，PCR的过程及其关键要素（引物设计），易错PCR 二、连接 粘性退火、平端连接酶 * 一、获取途径 cDNA的定义，PCR的过程及其关键要素（引物设计），易错PCR 二、连接 粘性退火、平端连接酶 * 转染未经外壳包装，而转导经过了包装 * 基因工程是现代生物技术的核心内容。基