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* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 《动物组织学与胚胎学》理论课件 绪论 周作红 江西农业大学 一、组织学的研究内容 组织学(histology):研究机体微细结构及其 相关功能的科学。 胚胎学(embryology):研究动物个体发生规律 的科学。 细胞:是机体形态结构与功能的基本单位。 组织:由细胞和细胞间质(又称细胞外基质) 组成的群体结构,是构成机体器官的 基本成分。 器官:具有一定的形态结构,并执行特定的 生理功能。 系统:由一些结构连续、功能相关的器官组合而 成,完成连续的生理活动。 细胞-组织-器官-系统 动物器官分类-组织学特征 实质性 器官 中空性 中央:大空腔 表面:被模 如:消化腺、淋巴器官 、 内分泌腺、肾脏等。 如:心血管、消化管、呼吸道等 内部:实质-行使功能 管壁:分3?4层 组织学结构观察 组织学 结构 光镜结构-用光学显微镜观察的结构 (LM)(light microscope ,LM 简称光镜) 电镜结构-电子显微镜下观察的结构 (EM)(electron microscope, EM简称电镜) 又称超微结构(ultrastructure) 二、组织学的研究方法和常用技术 (一)固定组织研究法 1、常用组织切片标本制备技术 石蜡切片术 ①取材和固定; ②脱水和包埋; ③切片和染色; ④封片。 其他;火棉胶包埋, 冰冻切片, 涂片,铺片,磨片等 糖类显示法-PAS反应: 过碘酸—希夫反应 (periodic acid Schiff reaction,PAS): 检测组织或细胞中有无多糖存在。 原理: 多糖 PA 氧化 醛 Schiff 试剂 紫红色沉淀 2、组织化学和细胞化学技术 PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 PAS阳性 小肠上皮 组织细胞化学染色图片 酶细胞化学 神经元ACP酶阳性 脂类显示法 苏丹Ⅲ 脂类显示法 苏丹Ⅲ 锇酸 髓鞘染色 核酸显示法 3、免疫组织化学与细胞化学技术 免疫组织化学术(immunohistochemistry) 是将免疫学原理与组织化学技术 相结合建立的新技术, 根据抗原与抗体特异性 结合的特点,检测组织 细胞内某种多肽、蛋白质 等大分子物质的存在与分布。 人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TM阳性 利用抗原(antigen, Ag),抗体(antibody)特异 结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。 免疫组织与细胞化学原理 4、原位杂交术 原位杂交(in situ hybridization) 是一种敏感性高、特异性强的, 能在组织细胞原位进行的核 酸分子杂交技术。 常用的标记物有两种: 1、放射性同位素, 如3H、14C、 32P、35S、125I, 2、为非放射性物质, 如地高辛等。 非放射性原位杂交 海马GAP-43 mRNA 5、放射自显影术 放射自显影术(autoradiograph) 旨在追踪某些物质在体内、组织 或细胞中的分布与代谢径路。 放射自显影 甲状腺125
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