纤维素-微生物的分离绪论.pptVIP

1、纤维素在生物圈的分布状况？ 2、纤维素酶的组成及作用？ 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 一、纤维素和纤维素酶 例：下列作物中，纤维素含量最高的是（ ） A、棉花 B、亚麻 C、秸秆 D、朩材 A、棉花 例：微生物体内能使纤维素分解成纤维二糖的酶是 。 C1酶和CX酶 例：要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出 来，应将它们接种在（ ） A、加入指示剂的鉴别培养基上 B、含有蛋白胨的固体培养基上 C、只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D、含四大营养要素的培养基上 纤维素 1、培养基：以_______为惟一碳源的选择培养基。 纤维素酶 纤维素分解菌 红色消失，出现透明圈 刚果红 纤维素 红色复合物 刚果红染色法 2、鉴别筛选的原理： 二、纤维素分解菌的筛选 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 例:在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生 的透明圈是（ ） A、刚果红与纤维素形成的复合物 B、刚果红与纤维二糖形成的复合物 C、纤维素分解后形成的葡萄糖导致的 D、以纤维素分解菌为中心形成的 课题2是将土样成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮 源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。 本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再 将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致. 1、本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？ 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？ 这样的环境中，纤维素分解菌的含量相对高 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际 上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应 将纸埋于深约10 cm左右腐殖土壤中。 3.将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋 进土壤多深？ 三、实验操作 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 目的？ “选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。 思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 选择培养使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用. 选择培养 参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题： a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？ b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是 如何进行选择的？ c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用 是液体培养基，原因是配方中无凝固剂 有选择作用，本配方中以纤维素为唯一碳源，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖. 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 染色法 优点 缺点 方法一 方法二 操作繁琐，刚果红会使 菌落之间发生混杂 操作简便， 不存在菌落 混杂问题 透明圈的产生 基本上是纤维 素分解菌的作用 透明圈的产生可能是产淀粉酶的细菌，也可能是能降解色素的细菌的作用 挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落 单菌落挑取 为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需 进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的发 酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素 酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸 等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。 课题延伸 例：用刚果红染色时，加入刚果红应在（ ） ①制备培养基时 ② 梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时 A、 ① ② B、 ② ⑤ C、 ③ ⑤ D、 ④ ⑤ 例：分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是 ①稀释倒平板法 ②涂布平板法 ③单细胞挑取法 ④选择培养基分离 A、 ①② B、 ②