光谱仪器教程方案.ppt

(四)分辨率 指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔，此间隔越小分辨率越高。它是分光光度计质量的综合反映。 单色器输出的单色光的光谱纯度、强度以及检测器的光谱灵敏度等是影响仪器分辨率的主要因素。 四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 (五)光谱带宽 光谱带宽（Spectral band width）是指从单色器射出的单色光最大强度的1/2处的谱带宽度。它与狭缝宽度、分光元件、准直镜的焦距有关，可以认为是单色器的线色散率的倒数与狭缝宽度的乘积。 测量方法：测量钠双线（589.0nm、589.6nm）的宽度。由于元素灯谱线本身的宽度大大小于单色器的宽度，故测得的光谱带宽可以认为就是单色器的光谱带宽。 四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 (六)杂散光 除所需波长单色光以外其余所有的光都是杂散光，是测量过程中的主要误差来源，会严重影响检测准确度。 可用截止滤光器测定杂散光：截止滤光器对边缘波长或某一波长的光可全部吸收，而对其它波长的光却有很高的透光率，因此测定某种截止滤光器在边缘波长或某一波长的透光率，即表示杂散光的强度。 四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 (七)基线稳定度 是指在不放置样品的情况下，扫描100%T或0%T时读数偏离的程度，是仪器噪声水平的综合反映。一般取最大的峰缝之间的值作为绝对噪声水平。如果基线稳定度差，光度准确度就低。 四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 (八)基线平直度 是指在不放置样品的情况下，扫描100%T或0%T时基线倾斜或弯曲的程度。 在高吸收时，0%线的平直度对读数的影响大；在低吸收时，100%线的平直度对读数的影响大。 基线平直度不好，可使样品吸收光谱中各吸收峰间的比值发生变化，给定性分析造成困难。 四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 五、紫外-可见分光光度计常见故障及排除方法 分光光度计常见故障包括光路、电路故障。根据故障不同应采取不同的排除措施。接通电源后，指示灯不亮，仪器不工作，可能是电路故障；读数表不能调零（即0％T）和不能置100％T则可能是光路故障或微电流放大器损坏。需根据具体情况采取不同的处理方法。 常见故障及排除方法 1.单色光偏差问题 2.光门出现问题 3.面板上调零和调100%电位器问题 4.电路部分问题 5.其他故障 分析条件的选择 一、仪器测量条件的选择 1.适宜的吸光度范围 根据朗伯-比尔定律微分后可知，当A=0.4343时，吸光度测量误差最小。 最适宜的测量范围为0.2-0.8之间。 2.入射波长的选择 根据被测组分的吸收光谱曲线，选择最强吸收带的最大吸收波长为入射波长。当最强吸收峰的峰形比较尖锐时，往往选用吸收稍低，峰形稍平坦的次强峰或肩峰进行测量。 3.狭缝宽度的选择 为了选择合适的狭缝宽度，应以减少狭缝宽度时试样的吸光度不再增加为准。一般来说，狭缝宽度大约是试样吸收峰半宽度的十分之一。 二、显色条件的选择 对多种物质进行测量，常利用显色反应将被测组分转变为在一定波长范围有吸收的物质。常见的显色反应有配位反应、氧化还原反应等。 显色反应必须满足一下条件： 1.反应的生成物必须在紫外-可见光区有较强的吸收能力，即摩尔吸光系数较大； 2.反应有较高的选择性，即被测组分生成的化合物吸收曲线应与共存物质的吸收光谱有明显的差别； 3.反应生成的产物有足够的稳定性，以保证测量过程中溶液的吸光度不变； 4.反应生成物的组成恒定。 二、显色条件的选择 1.酸度 显色反应最适宜的酸度范围可通过实验来确定：测定某一固定浓度的试样的吸光度随酸度变化，以吸光度为纵坐标，溶液的pH值为横坐标。 2.显色剂的用量 3.显色的时间和温度 三、参比溶液的选择 测定试样溶液的吸光度，需先用参比溶液调节透光度为100%（吸光度为0），以消除其他成分及吸收池和溶液等对光的反射和吸收带来的测定误差。 参比溶液的选择视分析体系而定，具体有： 1.溶剂参比 试样简单、共存其他成分对测定波长吸收弱，只考虑消除溶剂与吸收池等因素。 2.试样参比 如果试样基体溶液在测定波长有吸收，而显色剂不与试样基体显色时，可按与显色反应相同的条件处理试样，只是不加入显色剂。 3.试剂参比 如果显色剂或其他试剂在测定波长有吸收，按显色反应相同的条件，不加入试样，同样加入试剂和显色剂作为参比溶液。 4.平行操作参比 用不含被测组分的试样，在相同条件下与被测试样同时进行处理，由此得到平行操作参比溶液。 测定方法 一、单组分定量方法 单组分是指样品溶液中含有一种组分，或者是在混合物溶液中待测组分的吸收峰与其他共有物质的吸收峰无重叠。 其定量方法包括