07-体外介绍.ppt

体外分析 以放射性核素或其他非放射性物质标记的配体(Ligand)为示踪剂，以配体和结合体的结合反应为基础，在试管内进行的微量生物活性物质的检测技术。 体外分析技术建立的基础 以配体和结合体的特异性结合反应为共同的生物学基础 以结合反应动力学规律作为共同的方法学基础 以对标记物的测量技术作为共同的定量手段 生物学基础：特异性结合反应 抗原-抗体的免疫结合反应； 配基-受体的结合反应； 底物-催化酶之间的酶促反应； 　　 激素-激素结合球蛋白的结合反应。 方法学基础：结合反应动力学规律 遵守可逆反应的质量作用定律： k1, v1 [L]+[R] [RL] k2, v2 定量手段 放射性测量技术 酶定量技术 化学发光定量技术 荧光定量技术 RIA的基本原理 竞争抑制结合反应： 放射免疫分析是在体外条件下，由足量的非标记抗原（Ag）与定量的标记抗原（*Ag）对限量的特异性抗体（Ab）的竞争抑制结合反应。 基本原理 标准曲线的绘制方法 用一系列已知浓度的标准抗原和一定量的标记抗原在一定条件下同限量的特异性抗体进行反应； 在反应达到平衡后，利用适当的分离方法分离B和F； 分别测量B和F的放射性； 用反应变量（如B/F）作为纵坐标，反应剂量作为横坐标（即一系列标准抗原）作一