大肠菌群的检测剖析.pptx

大肠菌群的检测;大肠菌群的定义:;大肠菌群基本形态：;实验原理;实验器材;实验试剂;;大肠菌群及大肠杆菌测定 ——MPN法检验流程;实验内容与步骤; 2）乳糖发酵实验 接种1mL待检样品于乳糖胆盐发酵管内。接种3个稀释度，每一稀释度接种3管，置（36土1)℃温箱内培养（24士2) h。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠杆菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。;3）分离培养 将产气的发酵管分别转接在伊红美蓝琼脂平板上，置（36士1)℃恒温箱内培养18一24 h。取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。 ;4）证实试验 在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1一2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置（36士1)℃恒温箱内培养（24士2) h，观察产气情况。凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌，即可报告为大肠??群阳性。;查MPN表;实验报告;革兰氏染色;步骤：;革兰氏染色法操作步骤;5、复染：蕃红染液复染1min ,水洗。 6、吸干并镜检：若研究工作中要确证未知菌的革兰氏反应时，则需同时用已知菌进行染色作对照。; 细菌经结晶紫初染染成紫色。 革兰氏染色阳性菌（G+）细胞壁肽聚糖层数多，为空间网状结构，再经乙醇脱水，网状结构更为致密，染料复合物不易从细胞内漏出，仍为紫色。 革兰氏染色阴性菌（G-）细胞壁脂类含量多，肽聚糖层数少，为平面片层结构，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，结合的染料复合物容易泄漏，细菌被脱色为无色，再经蕃红复染成红色。