细胞生理学研究.ppt

细胞生理学; 离子的迁移不能简单地归结为扩散。因为扩散是物质由于分子热运动顺浓度梯度的迁移。由于离子都带有正电荷或负电荷，离子跨膜迁移除扩散外还受电场的影响。离子沿电场方向的运动是不同于扩散的另一种物理过程。本节将讨论两种过程协同作用下离子的跨膜流动。 由于离子有电荷，生物膜的脂双层对离子是高度不通透的，必需经过载体或跨膜的孔道。各种不同种类的离子通道（ion channel）是动物和植物细胞中离子跨膜流动的主要途径。;一、离子通道及其特性; 内向整流钾通道的结构最简单。这个超家族的基因编码的蛋白由两个跨膜α螺旋和连接两者胞外端的P环（pore loop）构成；4个相同的蛋白亚基围成一个钾通道。哺乳动物的钾通道结构与细菌中发现的钾通道完全一致，显示其进化上高度保守。多数其他的阳离子通道的孔道区（pore region）也是这个基本结构。例如，双孔钾通道超家族的钾通道分子序列包含两个与此类似的孔道区，电压门控钾通道超家族的钾通道分子序列是在一个孔道区的C端加接了4个α螺旋；而电压门控钙通道和钠通道则依次是电压门控钾通道的进化下游。; 2．离子通道的离子选择性; 在离子通道的研究领域，科学家曾很不能理解，为什么有些离子通道能够在高速通透离子的情况下对离子有极高的选择性?这不能用特定离子的高亲和结合位点来解释，因为亲和性越高，通透效率会越低。也不能用孔道大小来解释，因为Na+的直径(0.19nm)比K+的(0.26nm)小，却极难通过钾通道。后面这个事实同时也说明，离子通道并不是一个简单孔道。直到1998年，R·MacKinnon和同事用蛋白晶体的X线衍射分析学技术解出了细菌钾通道的分子结构，这个问题才得到回答。MacKinnon因此与研究水通道的Agre共享了2003年的诺贝尔化学奖。;钾通道的结构和离子选择性原理 ; 钾通道的分子结构显示，通道的内外入口处均有多个带负电的氨基酸残基，有利于增加附近阳离子浓度，也防止负离子进入通道。通道孔区的大部分相对宽大且有水，使得离子能够保持被水中8个氧原子包围的水合状态。在通道由胞内向胞外的2/3处，通道变窄，来自4个孔袢上羧基的氧原子朝孔道整齐排列，构成与水合离子中尺寸相同的“氧笼”。进入“氧笼”的每个K+周围都有8个氧原子，与其在水中的环境十分相似，大大降低了K+通过孔道的能量势垒，从而允许K+单列纵行通过孔道。而对于其他阳离子，如Na+，由于其体积较小，不能与“氧笼”匹配，能量势垒很高，通过率不足K+的1％。 ; 离子选择性和门控特性是离子通道的两个重要的特征。 离子通道的活动表现出明显的离子选择性，即每种通道都对一种或几种离子有较高的通透能力，其他离子则不易或不能通过。 通道对离子的导通，表现为开放和关闭两种状态。一般而言，处于激活状态的通道是开放的，处于失活状态的通道是关闭的。通道的功能状态受膜电位、化学信号和机械刺激等因素调控。由于推测通道的功能状态与其分子内部的“闸门”（gate）样结构的运动有关，因而生理学中将这一过程称为门控（gating）。根据引起门控过程的因素和门控过程的机制的不同，离子通道又可分为电压门控通道、化学门控通道和机械门控通道等。; 3．离子通道的随机活动; 电压门控钙通道的随机活动，异丙肾上腺素的刺激可提高电压依赖性钙通道的Po。 ;4．离子通道的激活及其能量转换功能 ;通道转运模式图 控制离子通道开闭的方式主要有上述三种。; 电压门控通道（voltage-gate dchannel）可因膜电位的改变而激活，包括电压门控钾通道、钙通道和钠通道等。每个钙通道或钠通道有4个结构域，每个结构域与电压门控钾通道的一个亚基同源，都有6个跨膜 α螺旋S1～S6。其中S4高度保守，富含疏水性、带正电的精氨酸（Arg）或赖氨酸（Lys）残基，被认为是通道的电压感受器。在静息的细胞中，细胞内相对细胞外的膜电位一般在-80～-60mV之间，这种极化状态对S4产生向胞内方向的电学吸引；如果膜电位向正的方向变，产生去极化，则对的S4电学引力减小，使通道发生构象变化的势垒降低，通道便被激活，并进入高Po的状态。; 电压门控通道：通道的开、闭受膜两侧电位差控制的离子通道，称为电压门控通道。 ;A： 丙氨酸 K： 赖氨酸 I： 异亮氨酸 F： 苯丙氨酸 M：甲硫氨酸; Na通道主要由一个较大的α-亚单位组成，有时还另有一个或两个小分子量的亚单位，分别称为β1和β2 ，但Na通道的主要功能只靠α-亚单位即可完成。这个较长的α-亚单位肽链中包含了4个结构类似的结构域，每个结构域大致相当于ACh门控通道中的一个亚单位，但结构域之间由肽链相连，是一个完整的肽链，应由一个mRNA编码和合成。而每个结构域中