紫外吸收光谱-下答案.pptVIP

紫外吸收光谱法的应用;（四）定量测定;Lambert-Beer 定律——光吸收基本定律; 当b 以cm，c 以 mol/L为单位，a称为摩尔吸光系数，用 ε表示。 ;吸光度的加和性 溶液中含有多种吸光物质且各组分之间不存在相互作用，则该溶液对光的总吸光度等于各组分的吸光度之和。;1）单组分测定;A;2）多组分测定; a b;1.0?10-3 mol/L的A物质溶液在420 nm和545 nm处的吸光度分别为0.200和0.050， 1.0?10-4 mol/L的B物质溶液在420 nm 处无吸收，在545 nm处的吸光度为0.420，今测得含两种物质的混合溶液在420 nm和545 nm处的吸光度分别为0.380和0.710，试计算该混合物中A和B的浓度。假设采用10 mm吸收池进行测定。;对A物质而言：;2.双波长分光光度法;以两组分x和y的双波长法测定为例：;选择波长组合λ1 、λ2的基本要求是：;Lambert-Beer定律：A=ebc;导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。导数光谱的最大优点是分辨率得到很大的提高。 1、可分辨两个重叠的吸收峰 2、可分辨吸光度急剧上升期所掩盖的弱吸收峰 3、能确认宽阔吸收带的最大吸收波长 奇数阶导数光谱中的零，偶数阶导数光谱中的极大或极小，与吸收曲线上的最大吸收相对应。 导数光谱的分辨率随导数阶数的增加而增加信噪比随导数阶数的增加而减小。;导数阶数的增加 峰越来越尖锐 灵敏度提高 分辨率提高; 1. 示差吸光光度法的原理 吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待测定组分浓度过高或过低，会引起??大的测量误差，导致准确度降低。示差吸光光度法可克服这一缺点。; 普通的分光光度法采用不含被测组分的空白溶液作为参比溶液。; 普通的分光光度法是绘制A和c的标准曲线； ;示差法提高准确度的实质;示差法的误差;小结;原理：同一光源发出的光被分为两束，分别经过两个单色器后获得两束不同波长的单色光，利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，根据比耳定律，样品溶液在两个波长为λ1和λ2的吸光度差值与溶液中待测物质的浓度成正比。