IRF2在胰腺癌中的功能和其对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响.pdf

第二部分沉默???对胰腺癌细胞生物学特性的影响目的：研究沉默???表达对胰腺癌细胞生长、增殖、侵袭、转移等的影响。方法：在得到稳定干扰???表达的胰腺癌细胞株后，通过?????羧胧?验、结晶紫实验、软琼脂克隆形成实验、裸鼠体内成瘤实验、细胞迁移实验、裸鼠体内转移实验等检验胰腺癌细胞系生长、增殖、侵袭、转移等生物学特点的变化，并且进一步从细胞周期改变及细胞凋亡方面阐述其机制。结果：??笛椤???羧胧笛椤⒔峋ё鲜笛榻峁?な党聊琁?．?谋泶镆种?细胞的生长、增殖能力??．??Ｈ砬碇?寺⌒纬墒笛椤⒙闶筇迥诔闪鍪笛楸?明下调???的表达以后胰腺癌细胞株的成瘤能力明显下降。流式细胞实验表明下调???的表达后胰腺癌细胞株的凋亡比例明显上升俨?．???赴鸊?瓽?期阻滞增加，?谙赴?壤?飨韵陆?????。进一步实验表明下调???的表达后，与生长、增殖相关的基因??、????明显下调；与凋亡相关的??、??????．??蛎飨陨系鳌Ｏ赴?ㄒ剖笛椤⒙闶筇迥谧R剖笛榉⑾窒碌鱅?一?的表达对胰腺癌细胞系侵袭、转移没有明显影响。结论：下调???表达对于?????和??．?认侔┫赴?甑纳?ぁ⒃鲋?和成瘤能力有着明显的抑制作用，而这种作用是通过改变细胞周期和细胞凋亡来实现；但是下调???表达对于细胞侵袭、转移能力没有明显的影响。关键词：干扰素调控因子?籖?干扰；生长和增殖；细胞周期；细胞凋亡第三部分沉默???砸认侔┫赴??泼舾行缘挠跋?目的：探讨沉默???以后对胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响。方法：??觳饧N魉?醵砸认侔┫赴?關???和?????陌胧?行Ъ亮????，了解这两种细胞对吉西他滨的化疗敏感程度，选取相对耐药的细胞进一步探讨沉默???表达对细胞吉西他滨的化疗敏感性的影响。??觳飧扇????基因后细胞对吉西他滨敏感性的变化。结晶紫实验和裸鼠移植瘤模型检测干扰???后是否增强吉西他滨对体外细胞克隆形成及体内成瘤能力的抑制作用。流式细胞技术检测沉默???基因前后细胞周期和细胞凋亡情况，????检测与细胞增殖和凋亡相关基因的表达情况，并探讨可能的机制。结果：??一?蚆????细胞中均表达???基因，在??．?赴?懈哂??????赴?２煌?ǘ纫┪镒饔??∈保?N魉?醵訮???细胞的半数有效剂量为?．?????痬??鳰???．?赴??．????／??????。接着，药物作用?小时，吉西他滨对??．?哉障赴?腎??滴???士???／?，干扰???泶锏南赴鸌??滴?．?????痬?尸?．???得飨碌鱅?．??虮????谝认侔┲械墓δ芗捌涠砸认侔┫赴??泼舾行缘挠跋?我们利用构建的??．?哉障赴?蚉???干扰???表达的细胞，不同浓度??? 凋亡相关的基因如切割的??舢、??蚦???．?黾印?达后，???细胞对吉西他滨的敏感性显著增加。在结晶紫实验中，与对照细胞??组相比，对照细胞?N魉?踝榧案扇臝??表达的细胞??组克隆形成能力下降?????，而干扰???表达的细胞?N魉?踝榭寺⌒纬赡芰γ?显下降??．??Ｂ闶筇迥诔闪鍪笛榻?徊剿得髁讼碌鱅?．?泶锖螅琍???细胞对吉西他滨的敏感性明显增强。同样，流式细胞技术表明，同其他三组相比，干扰???泶锏南赴?吉西他滨组?期细胞比例增加?????，?谙赴??例降低??．???赴?蛲霰壤?龈?????；与其他三组细胞相比，干扰???泶锏南赴?吉西他滨组????和??表达水平下降，而与细胞结论：慢病毒介导的??扇偶际跆匾煨猿聊琁?．?泶铮?銮恳认侔┫赴鸓????约N魉?醯幕?泼舾行浴?关键词?扇潘氐鹘谝蜃?；胰腺癌：吉西他滨；化疗敏感性第四部分???谝认侔┝俅惭?局械谋泶锛坝肓俅膊±碇副旰驮ず蟮墓叵?目的：研究???在胰腺癌临床样本中的表达情况，并分析???的表达与临床病理指标及预后的关系。方法：选取?例胰腺癌病人临床新鲜样本，利用免疫组织化学染色、蛋白免疫印迹、实时定量??觳釯??的表达情况：选取???认侔┎∪肆俅彩??样本制作组织芯片，利用免疫组织化学染色进行评分；分析???的表达与病人临床病理参数及预后的关系，探讨???对病人临床特征及预后的影响。结果?胝?６哉找认僮橹?啾龋?凳倍?縋?检测结果表明在胰腺癌中???高表达比例为?．?ィ幻庖咦榛?蚖?????表明???在癌组织中高表达。组织芯片结果表明???的表达明显上调?????，在癌组织中高表达比例为?．?ィ煌臣品治霰砻鱅?．?谋泶镉氩∪说腡?分期、肿瘤分化程度、肿瘤?制谟泄兀篢?分期???．??籔?．??；肿瘤分化程度???．?????．??；肿瘤?制?穿????；?????籙检验结果进一步确定这一结论。???—????媲?呓峁?⑾郑?∪俗艿闹形簧?媸奔湮???月；高表达???的病人中位生存时间为?．?拢坏捅泶颕?一?牟∪酥形簧?媸奔湮???月，差异具有统计学意义??