臭氧对兔膝骨关节炎的作用和机制研究.pdf

、??／?、??／?及??／?的等差浓度，以求能更精确的显示各个二、研究目的三、研究方法??不同浓度臭氧对兔膝骨关节炎的影响???锬Ｐ徒?ⅲ????痳?。中文摘要而且国内外使用臭氧治疗骨关节炎，各家使用臭氧的浓度、剂量、周期及频率各不相同。臭氧作为一种强氧化物质，使用过量必然会造成组织结构的损伤。那么，臭氧在骨关节炎中的作用究竟如何?俅仓瘟频氖焙颍?Ω檬褂迷跹?某?氧浓度?渲瘟频钠德省⑵荡斡Ω枚嗌伲?拍芗热〉昧己眯Ч??帜茏畲蟪潭缺?免其副作用呢???芯坎煌?ǘ瘸粞醵酝孟ス枪亟谘字腥砉羌盎?さ挠跋旒捌涔媛伞???芯坎煌?ǘ瘸粞醵酝孟ス枪亟谘鬃饔玫幕?疲和ü?芯坎煌?ǘ瘸粞醵匝?性介质?．???．?癕?．?的影响，来确定其作用途径和机制；并探讨使用何种浓度的臭氧更适合于兔膝骨关节炎的治疗。??芯坎煌?问?粞踝⑸涠酝孟ス枪亟谘字腥砉羌盎?さ挠跋欤?鄄觳煌?问?的臭氧对炎性介质?．???．?炯癕?．?的影响及其规律。??芯坎煌?问?粞踝⑸涠酝谜?Ｏス亟谥腥砉羌盎?さ挠跋欤?⒐鄄炱涠匝?性介质?．???一?炯癕?．?的影响，探讨臭氧注射是否具有累积效应。??岷螴???癗?畆．?种萍粒?芯砍粞醵匀砉窍赴?嘌?挠跋旒捌浠?啤???岢龀粞踔瘟仆孟ス枪亟谘椎闹瘟品桨福?V贫?俅补枪亟谘壮粞趿品ǖ谋?准化治疗方案提供更多科学依据。为了不干扰兔膝关节的内环境，使用关节外造模的方法，即兔膝关节屈曲位管形石膏固定术固定?埽?唇?⑼孟ス亟诠枪亟谘啄Ｐ汀???粞跖ǘ鹊娜范ǎ?临床上常用的臭氧浓度最高一般不超过???痬??ǔＮ??穏／??本实验所用臭氧发生器为德国赫美斯臭氧治疗仪??????????，其能产生的最大臭氧浓度为??／??，因此，实验中将臭氧浓度设为???痬??? ±砬衅?觳榧癕??甶?婪郑???砉恰⒒?ぷ橹?蠭?甀、???癕?．?的检测浓度等级的臭氧对关节组织结构的影响。???锓肿椋?根据所使用臭氧浓度的不同，将实验动物分为正常组、模型组、纯氧组及?个臭氧组：臭氧???痬?椤⒊粞????痬?椤⒊粞??．?／?组、臭氧???痬?组及臭氧???痬?椤Ｕ?Ｗ椴挥枞魏胃稍ぃ?Ｐ妥榻鲈炷２挥杵渌?稍ぃ?垦?组造模后在膝关节腔中注入医用纯氧???个臭氧组造模后分别在膝关节腔中注入相应浓度的臭氧????凶⑸淦德示??次／周，共?巍?软骨标本经过脱钙、石蜡包埋、切片、?染色后制作成病理切片，根据???评分标准对软骨表面结构、细胞数量、细胞克隆及基质染色?鲋副杲?行评分，每个指标均为??分，总分为各个指标得分相加。总分?治U?＃??分最高，分数越高损伤越严重。滑膜标本经过石蜡包埋、切片、?染色后制作成病理切片，观察滑膜组织是否完整、有无增生、是否有炎性细胞浸入、是否有细胞凋亡或坏死等，评价不同浓度臭氧对滑膜的影响。使用酶联免疫吸附???定????已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。分别将?．????甉及????蜕?锼乇昙堑目固逋?蔽掠?Ｏ吹雍螅?尤肭缀退乇昙枪?的??Ｔ倬??掠?拖吹樱?コ?唇岷系拿附岷衔铮?缓蠹尤氲孜顰、???酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中?．?????癕?．?的浓度呈比例关系，用标准物的浓度与?值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的?值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。???萃臣品治觯?数据统计使用???．?砑??砉荕???婪纸峁?S行蚍掷啾淞浚??用多个独立样本比较的????甒????煅椋?幼芴迳戏治?组之间有无差别。经????甒????煅楹螅?绻?组之间差别有统计学意义则进行组间多重比博士学位论文???珽???ā????????????? 以均数?标准差【?纒?硎尽???不同次数臭氧注射对兔膝骨关节炎的影响???锬Ｐ偷慕?ⅲ???±砬衅?觳榧癕???婪郑???砉恰⒒?ぷ橹?蠭?鉲、???癕?．?的检测：???萃臣品治觯?较的????煅椤??．???．?癕?．?的检测结果应用??畐?????蟹治觯?嘧?均数多重比较方差齐性时采用????狽???甂?????ǎ?讲畈黄胧辈?用?????法。不同臭氧浓度与?．???．?癕?．?表达之问的相关关系采用????相关分析。检验水准为????琍????硎静钜煊型臣蒲б庖寤蛴邢灾?圆钜臁＝峁?新西兰大白兔仅右侧膝关节进行骨关节炎造模，动物模型建立的方法同上所述。??粞跖ǘ鹊娜范ǎ?前述实验的结果提示臭氧作用于兔膝骨关节炎的最佳浓度为???痬????本实验部分使用的臭氧浓度为?“?痳?。???锓肿椋?根据臭氧注射次数的不同分为?椋?次组、?巫椤?次组、?巫椋?直?接受??即仅穿刺不进行臭氧注射??次、?渭?次臭氧注射。臭氧注射的浓度为??畉?痳?，进行多次注射时，注射间隔为?堋?同前所述，制作成切片后从表面结构、细胞数量、细胞克隆及基质染