2008级组织学技术.pptVIP

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组织学技术 ——概述、切片制备 ;概 述 ;;HE染色,脑垂体;扫描电镜术(scanning electron microscopy,SEM): 观察组织细胞表面结构;Transmission Electron Microscope;浆细胞;血细胞;组织化学技术;图像分析术-形态计量术;细胞培养术和组织工程;石蜡切片的制备;;2.动物选择;肌组织:纵切后结扎固定,以防因收缩而出现波浪形变化。取纵、横切面; 肝脏:右前叶或左外叶中部。纵切或冠状切面; 胆囊:取胆囊体部,附于滤纸,洗去胆汁后固定;;胰腺:取含有较多胰岛的胰尾部。 胃:取胃底或胃体。附于滤纸,防止卷缩; 肾脏:纵剖,再做扇形切面,皮、髓质均有。;;4.外科活体组织取材;5.取材注意事项;(二)固定 ;2.注意事项 ;固定的时间依组织的种类、性质、大小、固定剂的种类、性质、渗透力而定; 固定过程中时常摇动; 作好记录,组织名称、固定液、时间等;3.固定液的种类 ;4.固定的方式 ;二、洗涤、脱水、透明、浸蜡、 包埋 ;方法 固定液以水配制者——流水冲洗; 固定剂含乙醇者——不冲洗,或用与固定剂中乙醇浓度相近的乙醇冲洗; 特殊固定液洗涤法 ;(二)脱水;种类和效果 非石蜡溶剂的脱水剂:乙醇、丙酮等 脱水兼石蜡溶剂的脱水剂:正丁醇和环氧六烷等 ;(三)透明;(四)浸蜡(透蜡);(五)包埋;2.快速石蜡包埋法—用于快速诊断;三、组织制片法-切片 ;2.切片过程 ;1.制备石蜡切片的基本步骤。 2.组织取材和固定的注意事项。;四、染 色 ;2.染料特性 ;4.常规染色技术—HE染色 ;HE染色的步骤和方法 ;脱蜡: 二甲苯I、II,脱蜡必须彻底; 复水:梯度酒精,洗去溶解的石蜡和二甲苯; 水洗:普通水洗,蒸馏水洗; 苏木精染色:染色时间10-15min; 水洗:普通水洗净染液; 分色:盐酸酒精分色,将过染或不需 要染色的组织成分除去; 水洗:普通水洗净染液;;氨水蓝化:使细胞核进一步变蓝; 充分水洗:洗去盐酸酒精,终止其褪色作用; 伊红染色:染细胞质,时间勿长; 脱水:梯度酒精,一定要彻底; 透明:二甲苯I、II,确保切片完全透明; 封片:中性树胶;HE染色注意事项 ;小 结

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