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组织学技术
——概述、切片制备 ;概 述 ;;HE染色,脑垂体;扫描电镜术(scanning electron microscopy,SEM):
观察组织细胞表面结构;Transmission Electron Microscope;浆细胞;血细胞;组织化学技术;图像分析术-形态计量术;细胞培养术和组织工程;石蜡切片的制备;;2.动物选择;肌组织:纵切后结扎固定,以防因收缩而出现波浪形变化。取纵、横切面;
肝脏:右前叶或左外叶中部。纵切或冠状切面;
胆囊:取胆囊体部,附于滤纸,洗去胆汁后固定;;胰腺:取含有较多胰岛的胰尾部。
胃:取胃底或胃体。附于滤纸,防止卷缩;
肾脏:纵剖,再做扇形切面,皮、髓质均有。;;4.外科活体组织取材;5.取材注意事项;(二)固定 ;2.注意事项 ;固定的时间依组织的种类、性质、大小、固定剂的种类、性质、渗透力而定;
固定过程中时常摇动;
作好记录,组织名称、固定液、时间等;3.固定液的种类 ;4.固定的方式 ;二、洗涤、脱水、透明、浸蜡、
包埋 ;方法
固定液以水配制者——流水冲洗;
固定剂含乙醇者——不冲洗,或用与固定剂中乙醇浓度相近的乙醇冲洗;
特殊固定液洗涤法 ;(二)脱水;种类和效果
非石蜡溶剂的脱水剂:乙醇、丙酮等
脱水兼石蜡溶剂的脱水剂:正丁醇和环氧六烷等 ;(三)透明;(四)浸蜡(透蜡);(五)包埋;2.快速石蜡包埋法—用于快速诊断;三、组织制片法-切片 ;2.切片过程 ;1.制备石蜡切片的基本步骤。
2.组织取材和固定的注意事项。;四、染 色 ;2.染料特性 ;4.常规染色技术—HE染色 ;HE染色的步骤和方法 ;脱蜡: 二甲苯I、II,脱蜡必须彻底;
复水:梯度酒精,洗去溶解的石蜡和二甲苯;
水洗:普通水洗,蒸馏水洗;
苏木精染色:染色时间10-15min;
水洗:普通水洗净染液;
分色:盐酸酒精分色,将过染或不需 要染色的组织成分除去;
水洗:普通水洗净染液;;氨水蓝化:使细胞核进一步变蓝;
充分水洗:洗去盐酸酒精,终止其褪色作用;
伊红染色:染细胞质,时间勿长;
脱水:梯度酒精,一定要彻底;
透明:二甲苯I、II,确保切片完全透明;
封片:中性树胶;HE染色注意事项 ;小 结
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