miR22与miR200b对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制研究.pdf

本研究基金资助项目 1、国家自然科学基金 2、国家自然科学基金 3、国家自然科学基金 4、国家自然科学基金 5、湖南省自然科学基金 07JJ3033 6、湖南省高校创新平台开放基金 09K074 7、湖南省卫生厅科研课题计划项目 B2008-067 8、湖南省教育厅科学研究重点项目 09A077 9、湖南省科技厅科技计划 2008SK3010 万方数据 目 录 中文摘要1 英文摘要3 前言5 材料与方法7 结果 17 讨论 32 结论 36 参考文献 37 主要缩略词43 文献综述44 在读期间发表的论文 51 致谢 52 万方数据 miR-22 和 miR-200b 对胃癌细胞生物学行为 的影响及其机制研究 研究生：唐云云 导 师：苏琦 教授 中文摘要 目的：探讨 miR-22 与 miR-200b 对人胃癌 MGC-803 细胞生物学行为的影响及 分子机制。 方法：采用原位杂交实验检测 89 例胃癌组织及 41 例癌旁正常组织中 miR-22 与 miR-200b 的表达水平；采用荧光素酶报告载体系统检测 miR-22 和 miR-200b 对 Wnt-1 3’UTR 荧光酶活性的影响；采用 Western blot 和 qRT-PCR 检测 miR-22 和 miR-200b 对其调控靶基因的蛋白和 mRNA 表达变化；运用 RNA 干扰技术沉 默人胃癌 MGC-803 细胞中 Wnt-1 的表达；采用 MTT 法、细胞划痕实验、Transwell 侵袭实验以及AnnexinV- FITC 和 PI染色法检测miR-22 与 miR-200b以及 si-Wnt-1 对人胃癌 MGC-803 细胞生物学行为的影响。 结果：原位杂交结果显示，miR-22 与 miR-200b 在胃癌组织中的表达水平相对 比癌旁正常胃粘膜组织明显下调，且两者在胃癌组织中的表达呈正相关；在 89 例胃癌组织中，miR-22 与 miR-200b 的表达水平与患者的临床分期和淋巴结转移 呈负相关；荧光素报告载体系统证实 Wnt-1 是