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- 约 46页
- 2016-07-20 发布于河南
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病毒感染的检查方法与防治原则;教学要求;第一节 病毒感染的检查;病毒感染的检查*;一、标本的采集与送检;二、病毒的分离与鉴定;二、病毒的分离与鉴定;(一)病毒的分离培养
1.细胞培养
单层细胞培养(monolayer cell culture)
分类
悬浮细胞培养(suspended cell culture)
原代细胞(primary cell)
细胞种类 二倍体细胞(diploid cell)
传代细胞系(continuous cell line); ??????????????????????????????????????????????????????????????????
黄祯祥院士:首创病毒体外培养法新技术,为现代病毒学奠定了基础,被称为“在医学病毒学的发展史上第二次技术革命”;第一次使病毒定量测定的显微镜观察法被革新为肉眼观察法。 ;;病毒的细胞培养;1.细胞培养;特点:①对多种病毒敏感
②生长能力有限, 获取成本高
③可携带潜伏病毒;;;2.鸡胚培养
采用孵化9~14天的鸡胚
绒毛尿囊膜
痘苗病毒、人类疱疹病毒
尿囊腔
接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒
羊膜腔
流感病毒的初次分离
卵黄囊
嗜神经病毒 ;;;3.动物接种
应用:尚无敏感细胞的病毒培养
动物:兔、鼠、黑猩猩、猴等
优点:结果易观察,可建立动物模型
缺点:有饲养条件要求,费用高,动物
体内常带有潜伏病毒;1.病毒增殖鉴定*
(1)细胞病变效应*(cytopathic effect, CPE )
①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等(多数病毒);
②形成多核巨细胞或称融合细胞(麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等);
③在培养细胞中形成包涵体(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。 ;;①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落;麻疹病毒感染细胞;③形成包涵体(inclusion body);腮腺炎病毒感染细胞;红细胞吸附现象;(3)干扰现象(interference);(4)细胞代谢改变*
细胞代谢变慢
pH变化减慢
(5)细胞的病毒标记*:免疫荧光/酶标技术等
(6)病毒核酸*:PCR等;2.病毒形态学鉴定;3.病毒血清学鉴定;(2)免疫标记法(FIA、EIA、RIA??
——多种病毒鉴定
(3)凝胶免疫扩散试验(gel immuno-
diffusion test)
——多种病毒鉴定;4.病毒分子生物学鉴定;;(四) 新病毒的鉴定;三、病毒感染的血清学诊断;1.中和试验(neutralizing test);2.补体结合试验 (complement fixation test);四、病毒感染的快速诊断;(一)形态学检查;(二)病毒成分检测;(三)早期抗体检测;第二节 病毒感染的特异性预防;灭活疫苗(inactivated vaccine)
活疫苗(living vaccine)
重组载体疫苗(recombinant carrier vaccine)
亚单位疫苗(subunit vaccine)
化学提取或人工合成疫苗
重组疫苗(recombinant vaccine)
核酸疫苗(nucleic acid vaccine);二、人工被动免疫常用生物制品;第三节 病毒感染的治疗;思考题
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