2012.3本科生生物化学实验电泳技术原理精编.pptVIP

电泳原理与技术;?电泳支持介质必须具有：化学惰性、不干扰大分子的电泳过程，化学稳定性好、均匀、重复性好、电内渗小等特性。;一、醋酸纤维薄膜电泳;1.操作技术要领：;(5).染色;Alb(白蛋白);2.醋酸纤维薄膜电泳分离人血清蛋白质原理;polyacrylamide gel electrophoresis;（一）PAGE技术流程简介;通常采用过硫酸铵或核黄素来引发该过程,以N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(Tetranmethylenediamine,TEMED)为增速剂。该引发-增速的催化系统实质是自由基催化的氧化-还原过程。其结果是液态转变为逐步胶凝的半固体状态。凝胶形状取决于模具。;立体的网状结构中网眼大小与凝胶浓度相关:;凝胶内均匀的立体的网状结构示意图;凝胶浓度T (C=2.6%);引发剂和增速剂的浓度：浓度小易导致聚合速度慢；浓度过大则易导致电泳时的烧胶以及电泳带的畸变；一般控制使聚合过程在40~60分钟内完成。;（四）PAGE分离蛋白质原理;2.电荷效应;（五）影响蛋白质泳动速度及分离效果主要因素;3.温度;sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis;（一）SDS分离基本原理;;（二）未知蛋白质分子量的测定;1.电泳槽：是凝胶电泳系统的核心部分，管式电泳槽、垂直板电泳槽、水平板电泳槽;2.电源:;