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1.2 基因工程的基本操作程序;基因工程的基本操作流程; 目的基因主要是指 编码蛋白质的结构基因; 1)从基因文库中获取目的基因;1)从基因文库中获取目的基因;(1)构建基因组文库:
将某种生物体内的DNA全部提取出来,选用适当的限制酶,将DNA切成一定大小的DNA片段,然后将这些片段分别与载体连接起来,导入受体菌中储存,这个群体包含了这种生物的所有基因。;通过对受体菌的培养而储存基因;(2)构建cDNA文库;cDNA合成过程 ;基因组文库和部分基因文库;原核细胞的基因结构;真核细胞的基因结构;信使RNA的加工:; 如何从基因文库中得到我们所需的目的基因?;2)利用PCR技术扩增目的基因;5/;利用PCR技术扩增目的基因;3)人工合成
如果基因比较小,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。;基因表达载体的组成:;;; 1.农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物,植物体损伤分泌酚类化合物,吸引农杆菌。Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞的染色体DNA上.;将目的基因导入受体细胞(动物细胞);2.微生物作受体细胞原因:;;如果显示出杂交带,就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。;若不能表达,要对抗虫基因再进行修饰。
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