常用免疫组化试剂介绍.docVIP

常用免疫组化试剂介绍一、用于鉴别诊断 (一)上皮源性：1. 细胞角蛋白/cytokeratin.CK：目前，商品化的细胞角蛋白有20多种，不同的分子量代表不同类型的上皮标志。通常将CK分为两大类型：Ⅰ型（低分子量）；Ⅱ型（高分子量）。理论上讲，大多数单层上皮表达低分子量的CK；复层上皮多表达高分子量的CK；移形上皮（膀胱）和假复层上皮（呼吸道的被覆上皮）既表达低分子量的CK，也表达高分子量的CK。在癌组织中，低分子量的CK多在腺癌中表达，高分子量的CK多在鳞癌中表达。目前为止，未发现任何一种上皮只含有一种CK，某些上皮可含2-10种不同分子量的CK。因此，目前试图应用单一的CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。同样，应用CK来区别腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。因此，CK的免疫组化结果判断是一个较为复杂的问题，在应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。有必要时，应联合用多种CK加以综合判断。CK的阳性表达还包括有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。CK的阴性表达有：副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨（肉）瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤（除特殊类型外）。在判断CK免疫组化结果时应注意几点：（1） CK的单克隆抗体优于多克隆抗体；（2） CK常出现斑点状的假阳性反应，应注意识别；（3） 虽然大多数CK多在胞浆表达，但CK17多在胞核表达；（4） 绝大多数CK抗体需用胰酶消化，可增加阳性表达率和染色强度；（5） 部分非上皮性肿瘤（平滑肌肉瘤）可见有CK表达，在诊断时应注意；（6） 淋巴结、扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有CK8和18以及desmin,在判断淋巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。2.上皮膜抗原（epithelial membrane antigen/EMA）：EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白，广泛存在于人体各种上皮细胞中（也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤中），其分布与角蛋白相似，但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白，尤其是分化差的癌EMA有时可呈强阳性表达。EMA可作为上皮源性肿瘤的常用标记物。EMA阳性表达的肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。在判断EMA免疫组化结果时应注意几点：（1） EMA虽然是上皮细胞非常敏感的标记，但一些非上皮性肿瘤（如浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤）也可阳性表达。因此在癌和其他间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一的参考标记；（2） EMA对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于体表上皮源性肿瘤，因此在腺癌中的表达明显高于鳞癌。3.桥粒蛋白：是上皮细胞特有的结构，是一种广谱的上皮性标记。鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌和间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点：（1） 桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢的颗粒细胞瘤和淋巴结的网织细胞中表达；（2） 甲状腺间变癌阳性表达率低；（3） 冰冻切片效果优于石蜡切片。（二）间叶源性肿瘤的标记1.波形蛋白Vimentin：是一种52-58的胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源的肿瘤，是间叶细胞及其肿瘤的特异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤和骨肿瘤Vimentin是一个关键标记。此外，血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病和恶黑等均可有Vimentin表达。在判断Vimentin免疫组化结果时应注意几点：（1） 部分肿瘤（如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等）除Vimentin（+）表达外，可同时又有cytokeratin的表达。应结合其组织学形态加以诊断。（2） 福尔马林固定的组织标本，vimentin 假阴性并不少见，冰冻切片酒精固定的组织可提高其敏感性和可靠性；（3） vimentin不能单独用于软组织肿瘤的诊断，多提倡与其他特异性标记物联合使用。2.结蛋白desmin：是一种分子量为50-55ku的细胞浆蛋白，胚胎和成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子宫、皮肤、胃肠道及其他部位的平滑肌多呈（+）表达。现已发现desmin在良性肿瘤的阳性率和染色强度明显高于恶性肿瘤；高分化的平滑肌肉瘤和染色强度明显高于低分化的平滑肌肉瘤。 Suster报道5例皮肤是上皮性平滑肌肉瘤均为（-），而actin 和vimentin均为（+）反应。因此目前认为，多应用配套抗体，即与其他肌源性抗体联合应用，不能只根据desmin (-)来排除平滑肌肉瘤的诊断。在判断desmin免疫组化结果时应注意几点:（1） 非常原始的肌源性肿瘤常不表达 des