光谱与质谱.pptVIP

南京农业大学 生命科学学院;第七章 光谱与质谱;第七章 光谱与质谱;*;第七章 光谱与质谱;第七章 光谱与质谱;第七章 光谱与质谱;第一节 紫外-可见光谱;第一节 紫外-可见光谱;第一节 紫外-可见光谱;第二节 红外光谱;第二节 红外光谱;第二节 红外光谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;质谱分析仪的组成： 离子源 其作用使样品离子化，并使离子汇聚成具有一定形状和能量的离子束。它是质谱仪的心脏。离子源的结构和性质对质谱仪的分辨率、灵敏度影响很大。使物质电离的方法很多：电子轰击，化学电离、火花电离、ICP离子源等。 质量分析器 作用是将离子源产生的离子按质荷比 m/z 大小分离，使符合条件的离子飞过分析器，过滤掉不符合条件的离子。常见的有单聚焦质量分析器，双聚焦质量分析器和四极滤质器等。 离子检测器和记录系统 经质量分析器分离的离子，到达检测器进行接受检测，经放大器放大后，由记录仪记录下来。常用离子检测器：静电式电子倍增器、法拉第筒接受器、照相版和闪烁计数器等。;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;第三节 质 谱;*;第四节 核磁共振;第四节 核磁共振;第四节 核磁共振;第四节 核磁共振;这两种取向的能量： γ为磁旋比；h为普朗克常数；H0为外加电场强度。 因此对于1H核来说产生自旋能级的跃迁所需能量与外磁场强度成正比，用电磁波来照射外磁场中的自旋氢核，当某频率(V)电磁波的能量（E=hv）恰好与1H核两个能级之间的能级差相等时， 1H核就吸收能量，由低能态跃迁到高能态，发生核的转向（从顺磁向转到反磁向）。这种现象就叫核磁共振。 产生核磁共振条件： 可见，固定H0，改变ν射或固定ν射，改变H0都可满足上式，发生核磁共振。但为了便于操作，通常采用后一种方法。 ;第四节 核磁共振;第四节 核磁共振;第四节 核磁共振;核磁共振波谱仪;第五节 分光光度法;第五节 分光光度法;1.基本原理 Beer-Lambert 定律 当a、c一定时，吸光度A与液层厚度b成正比，称为朗伯定律。 当a、b一定时，吸光度A与溶液浓度c成正比，称为比尔定律。 吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，称为朗伯—比尔定律，即光的吸收定律。其数学表达式为：A=abc a为比例常数，称吸光系数，有两种表示方式： 摩尔吸光系数，是指在一定波长时，溶液浓度为1mol/L，厚度为1cm的吸光度，用ε或EM表示。 百分吸光系数或称比吸光系数,是指在一定波长时，溶液浓度为1%(W/V)，厚度为1cm的吸光度，用E1%1cm表示。 吸光系数两种表示方式之间的关系是： ε= Mr/10× E1%1cm;1. 基本原理 摩尔吸光系数是物质对某波长的光的吸收能力的量度。ε越大，吸收光的能力越强，相应的分光度法测定的灵敏度就越高。ε值越大，说明电子跃迁的几率大，通常 ε＝10-105：一般认为ε＞ 104为强吸收；ε＝103-104 为较强吸收；ε＜102 为弱吸收，此时分光光度法不灵敏。 因为通常使用分光光度计可检测出的最小吸光度A＝0.001, 所以，当b＝1cm，ε＝105时，可检测的溶液最小浓度是C＝10-8 mol/L。 ε的值很难直接测定，通常要先测出E1%1cm再按公式计算求得。 吸光度“A”有一个重要性质是其具有加和性： 即混合物的总吸光度等于溶液中的各组份各自在该波长下吸光度的算术和。这是多元混合物分光光度法定量分析的基础。若溶液中各溶质的吸光系数ε相同，则各溶质吸光度的大小与溶质浓度成比例。;1. 基本原理 影响吸光系数的因素： 物质不同。吸光系数可作为物质的特性常数。分光光度法中，常用摩尔吸光系数ε来衡量显色反应的灵敏度，ε值越大，灵敏度越高。 溶剂不同。所以在说明某一物质的吸光系数时，应注明溶剂。 光的波长不同。如将不同波长的单色光依次通过被分析物质，分别测得吸光度，然后绘制吸光度-波长曲线，称为吸收曲线，又称吸收光谱。由吸收曲线可以看出物质的吸收特征。吸收曲线上有极大值的部分，称为吸收峰。吸收峰所对应的波长，称为最大吸收波长，以符号λmax表示 ，这是物质定性的依据之一。物质的定量也常选择在λmax处测定其吸光度，因为在此处测定的灵敏度最高。 单色光的纯度。单色光越纯，即经单色器分光后的波长范围越窄，其吸光系数越大。严格说来，朗伯-比尔定律只有当入射光是单色光时才完全适用，但实际上不管仪器中光学系统的质量怎样高，单色化以后的光还是具有一定的宽度，这取决于仪器的精确程度。滤光片的分光本领较差，故一般测得的吸光系数要比真值小得多。;第五节 分光光度法;2. 分光光度计的组成 单色器： 单色