血清酶类测定.pptVIP

血清酶类测定;第一节 概述;血浆特异酶 　 为血浆蛋白的固有成分，含量高于其他组织，在血浆中发挥特定的催化作用。多数由肝脏合成并以酶原形式分泌入血，在一定条件下被激活起作用。与凝血有关的酶或酶原、ChE、Cp及LPL等。 非血浆特异酶 外分泌酶：由外分泌腺合成并分泌进入血浆的酶,包括P-AMY、P-LPS、前列腺ACP等。 细胞内酶：存在于细胞内进行物质代谢的酶，随着细胞的不断更新或破坏可少量释入血液，细胞内外浓度差异悬殊，当其大量出现于血清中时，提示酶的来源组织细胞受损，最常用于临床诊断。;二、血清酶变化的病理生理机制;（二）血中酶的清除： ;三、血清酶的生理变异 ;四、酶的区域化分布 ;五、酶活性测定在临床诊断中的应用 ;（二）在诊断急性心肌梗死中的应用;（五）在诊断肌肉疾病中的应用;第二节 临床常用血清酶活性测定;标本（血清或血浆）; 标本应避免溶血：; 尽量用血清标本： ;氨基转移酶活性测定;[测定方法];1. 该ALT测定法中存在两个消耗NADH的副反应;（二）定时比色法（两点法）;赖氏比色法;活性单位;方法评价 ;[参考区间]; ALT广泛分布于全身各组织器官，尤以肝细胞中含量最多，其次是肾脏、心脏及骨骼肌，通常只有极少量释放入血液，所以血清中此酶的活力很低，当这些组织病变时，细胞坏死或通透性增加，细胞内酶大量释放入血，使血清中该酶活力显著增高。 ;ALT在肝脏疾病中的应用价值;ALT增高程度与肝硬化的活动度和肝组织炎症改变及肝细胞损害程度相一致。对ALT进行监测有助于对肝硬化病情的判断。若是静止性肝硬化，则ALT维持正常 ；肝硬化病人的转氨酶出现较大幅度的升高，提示病情可能发展成活动性，须引起警惕。 ;血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性测定; AST L-天门冬氨酸 + α-酮戊二酸 ? 草酰乙酸 + L-谷氨酸 自发↓脱羧 丙酮酸;[参考区间];[临床意义];AST/ALT比值大小有助于临床判断肝病严重程度;血清碱性磷酸酶（ALP）活性测定;[测定方法];1．测定ALP活性受缓冲液种类的影响 2.血清标本应新鲜，置室温(25℃)6h测定???ALP活性约增高1％；置室温1～4d，ALP活性增高3％～6％；若冰冻保存，血清复溶后ALP活性升高可达30％。 3．血清稀释度对ALP活性测定有影响。血清与底物缓冲液之比一般在1：50～1：100之间。稀释度低于1：50时，酶活力降低。 4．一般用血清与肝素抗凝血浆测定ALP活性。抗凝剂如EDTA-Na2、草酸盐、柠檬酸盐等因能络合Mg2+而抑制ALP活性，故不能使用这类抗凝剂的血浆做于ALP活性测定。 5．ALP测定受年龄与性别、饮食、运动和妊娠等因素的影响。 ;灵敏度高、线性范围宽（500U/L以上）和精密度高，是我国及IFCC的推荐方法;二、金氏比色法 原理;　磷酸苯二钠比色法与更早的布氏法相比具有较大的优点，如水解速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。但与磷酸对硝基酚速率法相比，准确度、精密度较低；操作比较繁琐,，灵敏度低。;活性单位;[参考区间];ALP检测主要用于诊断肝胆和骨骼疾病;血清酸性磷酸酶（ACP）活性测定; ACP的测定底物、原理和方法与ALP 相似，只是反应pH为 酸性。如利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下 测定ACP。国外多推荐使用磷酸麝香草酚为底物的比色法。 由于ACP不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定ACP（特别是PAP）。 因红细胞及血小板富含ACP，标本不能溶血且血标本采取后必须尽快分离血清（血浆）并立即测定。不同方法参考范围也不同。;[临床意义];血清?-谷氨酰转移酶（GGT）活性测定;[测定方法]; 本法准确度好；精密度好线性范围宽（460U/L）；操作简便；底物溶解度高、稳定性好，自身水解作用小，是IFCC的推荐方法。但对试剂纯度要求高; 以γ-谷氨酰α-萘胺作为γ-谷氨酰基的供体，双甘肽作为受体，在GGT作用下，产生α-萘胺，后者与重氮试剂反应，产生红色α-萘胺-对-偶氮苯磺酸，其色泽的深浅与GGT活力成正比。;操作简便，颜色稳定，线性关系好，适合一般分光光度计应用，但底物水溶性较差，缓冲液和pH对结果影响较大，现已较少应用。 ;[参考区间];[临床意义];血清淀粉酶（AMS/AMY）活性测定;[测定方法]; 原理;二、碘-淀粉比色法 ;活性单位;[参考区间];[临床意义];急性胰腺炎时