Eppendorf plus 移液枪校准方法.doc

Eppendorf plus 移液枪校准方法 1、准备超纯水、万分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。 2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。 3、吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。 4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。 5、根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。 6、重复3、4步，直至偏差在ISO8655的要求内为止。 ISO 8655-1-2002活塞式容量测量仪器.第1部分:术语、一般要求和用户使用建议  HYPERLINK /standard/244750.html \t /standard/_blank ISO 8655-2-2002 活塞式容量测量仪器.第2部??:活塞式吸量管 ISO 8655-6-2002 活塞式容量测量仪器.第6部分:确定测量误差的重量分析法 三、校准方法及步骤操作环境：温度应控制在15-30℃，恒定在±0.5℃，相对湿度50%-80%，要保持较高的空气湿度以减少水分蒸发对结果造成的影响。建议使用防蒸发装置。测试应在独立无通风的房间内进行，并配备温度和湿度显示。所需设备： 1、分析天平一台。确保室内空气流动平缓，应避免天平正对空调出风口。根据所测试的移液器的容量来选择适合的天平： 移液器容量范围天平可读性天平的重复性和线性测量不准确度1μl~10μl0.001mg0.002mg≤0.002mg10~100μl0.01mg0.02mg≤0.02mg100μl0.1mg0.2mg≤0.2mg? 2、纯水、三蒸水或去离子水，需达到ISO 3696三级水的标准。3、独立工作间，配备防震、防尘、远离热源、无阳光直射的操作台。4、温度计、湿度计。校准操作：为确保校准的准确性，采用三点移液十次，具体步骤如下：1、同温处理，将移液器、吸头、天平、测试用水、操作台等校准用具放置在同一工作间内，至少四小时。2、在正式操作前，先预洗吸头，吸排测试用水5次。3、用最大体积、50%最大体积和最小体积（或10%最大体积），各移液10次，记录每次移液的质量。4、计算每组数据的平均值，代入计算公式，计算出不准确度与不精确度。5、对比可允许的最大误差限度，根据实际需要确定进行调整。附：相关计算公式质量体积转换公式1：V=(w+e)×Z 式中： V=体积（μl）w=质量（mg）e=蒸发损失（mg）Z转换因子以上公式参考ISO 8655标准。蒸发损失对测量小体积液体影响较大，因此应将蒸发损失计算在内。方法：在称过重的容器中注入定量清水，按下秒表观察30秒，读出损失量，然后算出每秒的损失量。（若30s内质量损失3mg，则损失量为3mg÷30s=0.1mg/s）。记录移液时间，将移液时间乘以每秒损失量，算出实际蒸发损失量，代入上述公式计算实际体积。若使用防蒸发装置，通常可以忽略蒸发损失量。不同温度、压力下水的质量和体积不同，具体转换因子Z值请查看附录1。公式2：V20=m×K(t)式中： V20=标准温度20℃下实际体积（μl）m=质量（mg）K(t)值以上公式参考JJG 646-2006移液器检定规程。根据天平测试蒸馏水的质量，以及检测时温度所对应的K(t)值，即可计算出标准温度下蒸馏水的实际体积。具体K(t)值请查看附表2。计算式时，请根据实际需要，选择公式进行计算。不准确度（系统误差）不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。A=- V0 式中： A=不准确度=平均值V0 =标称容量A%=100%×A/V0 不精确度（随机误差）不精确度指每次实际移取体积与实际体积平均值的差异，其变化是不可预计的测量误差的一部分。它可以表示为标准差S或变异系数CV：式中： S =标准偏差=平均值n =测量次数Vi =单次测量数值CV=100%×S／附表1：转换因子Z(μl/mg)数值表（无菌水） 温度气压（KPa） 1KPa=10hPa（℃）80859095100101.310515.001.00171.00181.00191.00191.00201.00201.002015.501.00181.00191.00191.00201.00201.00201.002116.001.00191.00201.00201.00211.00211.