性病实验室检测的技标准和操作规程.docVIP

生殖医学中心 性病实验室检测操作规程 参照标准：1、乌鲁木齐市性病医疗机构规范化管理资料汇编，2002.11.07，38 2、试剂相关说明书 目 录  TOC \o 1-3 \h \z \u  HYPERLINK \l _Toc203970297 一、淋病检查的实验室技术  PAGEREF _Toc203970297 \h 2  HYPERLINK \l _Toc203970298 (一)分泌物涂片检查  PAGEREF _Toc203970298 \h 2  HYPERLINK \l _Toc203970299 （二）淋球菌的分离培养  PAGEREF _Toc203970299 \h 3  HYPERLINK \l _Toc203970300 （三）淋球菌的保存  PAGEREF _Toc203970300 \h 4  HYPERLINK \l _Toc203970301 （四）氧化酶试验  PAGEREF _Toc203970301 \h 5  HYPERLINK \l _Toc203970302 二、支原体的检测  PAGEREF _Toc203970302 \h 5  HYPERLINK \l _Toc203970303 三、衣原体检查  PAGEREF _Toc203970303 \h 6  HYPERLINK \l _Toc203970304 四、梅毒的实验室检测  PAGEREF _Toc203970304 \h 7  HYPERLINK \l _Toc203970305 (一)直接镜检  PAGEREF _Toc203970305 \h 8  HYPERLINK \l _Toc203970306 （二）非特异性梅毒螺旋体试验  PAGEREF _Toc203970306 \h 8  HYPERLINK \l _Toc203970307 五、TPHA梅毒螺旋体血凝试验  PAGEREF _Toc203970307 \h 9  一、淋病检查的实验室技术 (一)分泌物涂片检查 急性淋菌性尿道炎患者常有大量脓性分泌物。在有些脓细胞内可见革兰氏染色呈阴性的双球菌，椭圆或球形，常成双排列。因形态特殊，可取患者尿道分泌物制成涂片后染色，检查有无典型细胞内革兰阴性双球菌，可作为初步诊断的依据。 标本采集 尿道分泌物、宫颈粘液、尿的离心沉淀物。 涂片镜检 涂片后，待自然干燥后，加热固定，行革兰染色，油镜观察。 结果 在急性患者的尿道脓性分泌物革兰染色涂片中，常可见到大量红色多形核白细胞，有些细胞中吞噬有淋球菌。多数多形核白细胞中并不含淋菌，但不少细胞中常含有1对或数对，甚至20~30对。淋球菌常存在于细胞浆内。 在病期较长或经过治疗的淋病患者的涂片中淋球菌比较少，有时呈单个、四联和八叠状，且常位于细胞外。 对有些细菌难以下结论时，需进行培养和鉴定。 注意事项 1．涂片时不要用力涂擦，而应将棉拭在玻片上轻轻滚动。涂擦过重，细胞容易破裂变形，致细菌从胞内溢出。 2．涂片厚薄适宜。过厚，加之染色过程中脱色时间不足，革兰染色易呈紫色。因此，脱色时间要视涂片厚薄而定。 3．固定涂片时，迅速通过火焰2~3次，避免加热过度使细胞变形。热度以不烫手为宜。 4．不推荐用涂片检查来诊断淋菌的直肠和咽部的感染，也不推荐用来作判愈。 方法评价 涂片检查方法简便、有效、价格低廉且有一定的敏感性和特异性。但其特异性随取材部位的不同而有所不同。男性尿道取材特异性较高，而从女性子宫颈取材特异性较低。因此，世界卫生组织不推荐用涂片法来诊断女性患者。 革兰染色 （一）操作步骤 细菌涂片须经火焰固定。 先用甲液滴加在标本上，加的量以盖住标本为准，再加等的乙液，混匀，染3-5秒钏，用自来水从玻片的一端冲去染液，甩干。 滴加适量碱性碘液在标本上，3-5秒后，自来水冲洗，甩干。 丙酮酒精脱色，脱色的标本为：当丙酮酒精滴加在标本上，不出现蓝色或淡紫色为宜。 用碱性复红复染，覆盖标本，3-5秒后，自来水冲洗，待其自然干燥或用吸水纸吸干，油镜观察。 （二）革兰染液 1．碱性结晶紫液 甲液 结晶紫 2.5g 蒸馏水 1000ml 结晶紫置于研钵中,加入少量的蒸馏水,并使之溶解,待其完全溶解后,移入所备容器中,并用蒸馏水将研钵中的染料尽量洗下,补充蒸馏水到1000ml。 乙液：NaHCO3 12.5g 蒸馏水 1000ml 2．碱性碘液 碘 2g NaOH（1mol/L） 10m