多种环境化学物经人CYP2E1代谢活化作用的研究.pdf

万方数据 菴??切偷哪谠葱员泶铩１狙芯磕獠捎眉韧?谥刈閂?细胞系观察到具有依赖于人???的强致突变性的??和???赴??形⒑耸匝椋?鄄?度。同时构建表达人???的??苌?赴??运?魑S胪ü鼳?途径诱人体后，于肝脏中由???代谢成苯酚、氢醌，之后这些中间产物经血液进入骨髓由髓过氧化物酶活化为苯醌，引起致突变效应并最终导致白血病的发生。与苯?罴虻サ姆枷阕寤?衔?不同，?患谆?攀峭榛??嗷贩继?牡湫痛?恚?再经??酶活化为终毒物?换腔?谆?牛??钦庑┦笛榻鐾ü?铣傻闹屑浯??物?霍羌谆?爬垂鄄欤?腥狈Σ溉槎?锵赴?喙氐亩拘匝芯俊１究翁庾榍捌谘?究通过微核试验发现，人???具有持续活化苯成为醌类终毒物的能力。同物、??谆?乓约?一羟甲基芘对??甴???．????盏嫉南赴?拘郧慷取?方法核试验的浓度范围?赴?婊?????ヒ陨?，观察???赴?┞队赑??后微核细胞发生频率。同时观察???选择性抑制剂反式??欢?纫?摘要选择性???抑制剂对??以及依赖于其它??代谢活化的间接致突变物诱发微核效应的影响，以此探索各种??对受试??代谢活化作用的相对强导的??酶系的代表来进一步验证以???赴?DＰ偷姆⑾帧?苯是经典的间接致突变物，其在人类生活以及工业中广泛存在与应用。早在??年己由国际癌症研究署???确定为环境致癌物。以往认为苯在进入其通过各种人类活动如吸烟、汽车尾气以及熏制食品产生。尽管通过生化试验以及细菌致突变试验已发现??谆?拍苡啥嘀諧?酶亚型活化为?霍羌谆?牛?时用微核试验与次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶???位点致突变试验观察到??甲基芘经过?嗪虸?啻?幻噶??罨??鹨糯ǘ拘孕вΑ５?撬?窃谙赴??性方面数据有待完善，本次研究采用??駽??试验检测苯及其羟化代谢??捎肅?一?匝榉治?，??’一三氯联苯?????，??’．三氯联苯????訪．?细胞生存／生长的影响，每组设?鲋馗床馐浴８?菹赴?拘跃龆ㄎ??与??? 万方数据 件?????，?簐?拢琇．?细胞中其他??亚型??????、??以及??的特异性代谢活化能力以苯并??藕突魄?苟舅谺???????捎帽嗦胍吧?腿薈????虻恼婧吮泶镌靥遄H綱?细胞，经抗生所表达的酶蛋白的免疫原性和酶活性，从而构建稳定表达人???的重组??验重复?霾馐裕?⒑耸匝樯杓?个重复测试。养可阻断两种??诱发微核的效应。??可抑制??烯???约岸?籽琼????才嘌?晕⒑诵纬傻挠跋臁????种铺?导微核形成来反映。每个浓度组设计?鲋馗床馐浴?素筛选，并通过蛋白免疫印迹与???依赖性间接致突变物诱发微核，鉴定细胞系??．????。在此基础上，采用???试验和微核试验观察???，?，?及?分别对??????隫?????细胞的细胞毒性和遗传毒作用。细胞暴露于受试化合物??蠹绦?嘌??，每个浓度组??????捎肕?法或???法分析苯及其羟化代谢物、??谆?乓约?一羟甲基芘对??甴???一????细胞??细胞衍生细胞，重组表达人???与人????生存／生长的影响。???与????冈谡庑┫赴?拘в?中的作用??换罨?蚪舛?，则依据其特异抑制剂?话被?讲⑷?蛴胛迓缺?酚共培养对细胞存活／生长的影响来判断。每组设置?鲋馗床馐浴???臣蒲Х治鯩?、???与微核试验结果以均数±标准差表示，通过方差分析进行检验，以????2钜炀哂型臣蒲б庖宓谋曜肌?结果?与???等化合物诱发???⒑说男вσ约叭薈???种?剂的影响?和???都在???／?陨吓ǘ纫?鹨欢ǖ南赴?拘裕??赴??存率均高于?％。在加入了???????疞?螅?赴?拘月杂屑跞酢??与???均诱发???赴?⒑诵纬桑?页拭飨缘呐ǘ纫恍в?叵怠６鳧?共培?诱发???赴??硕士学位论文?甈???? 万方数据 核的作用，表现为??％??簐?ǘ仁背氏滞耆?种?印证??抑制人?????榷ū泶锶薈???腣?细胞系的构建与??与??哉障赴?煌????H?含人???的??的?婧吮泶镌?形成率为?．???６缘タ寺』?目股?氐挚瓜赴??械牡鞍酌庖哂〖Ｊ匝椋????依赖性间接致突变物苯并?????，?，?均能诱发微核细胞率增高；其中?????疞?聪允鞠赴?拘裕?，??．三羟基苯于些结果以细胞毒作用为试验终点提示人???可继续活化氢醌和儿茶酚为细活性?欢鳧??３?％。?：?时，???虯??慈匀挥盏糒．?细胞微核形成并呈现明显的浓度．效应关系，提示??对???赴?囊糯ǘ拘вχ饕?依赖于人???的活性，而另外几个??亚型没有明显的作用。?，?，?及?对??甴???和??甴???诱发微核的作用。体的细胞能够在含博来霉素???／?的选择性培养液生长并形成集落???观察到其具有人???蛋白表达，而未转染的??赴?蛭薇泶铩２⑶????疞?宰H鞠赴?辗⑽